Descripción del proyecto
LOS PATOGENOS BACTERIANOS CODIFICAN SISTEMAS DE VIRULENCIA QUE FACILITAN LA COLONIZACION DEL TEJIDO VEGETAL Y ENTREGAN PROTEINAS DE VIRULENCIA QUE SUPRIMEN LAS DEFENSAS DE LA PLANTA. PSEUDOMONAS SYRINGAE ES UNA BACTERIA FITOPATOGENA MODELO CON RELEVANCIA ACADEMICA Y AGRONOMICA. SU CAPACIDAD PARA ADAPTARSE A DIFERENTES NICHOS ES CLAVE EN SU EXITO EPIDEMIOLOGICO. LA VIRULENCIA DE P. SYRINGAE REQUIERE SU SISTEMA DE SECRECION DE TIPO III (T3SS) QUE INTRODUCE EFECTORES DENTRO DE LA CELULA HUESPED, DONDE SUPRIMEN LA ACTIVACION DE DEFENSAS, PERMITIENDO QUE EL PATOGENO PROLIFERE Y COLONICE EL APOPLASTO DE LA HOJA. SIN EMBARGO, NUESTRO GRUPO HA DEMOSTRADO QUE SOLO PARTE DE LA POBLACION BACTERIANA EXPRESA LOS GENES DEL T3SS EN EL APOPLASTO. ADEMAS, LA EXPRESION DEL T3SS EN POBLACIONES CLONALES DE P. SYRINGAE ES BIESTABLE IN VITRO, CON DOS SUBPOBLACIONES BIEN DEFINIDAS DE BACTERIAS T3SSON Y T3SSOFF EN MEDIO DE INDUCCION DEL T3SS, SUBPOBLACIONES QUE INOCULADAS POR SEPARADO PRESENTAN DIFERENCIAS EN VIRULENCIA. OTRO COMPONENTE CLAVE PARA LA ADAPTACION DE P. SYRINGAE A DIFERENTES NICHOS ES EL FLAGELO, QUE PERMITE EL MOVIMIENTO Y EL ACCESO A NUTRIENTES Y AL APOPLASTO DE LA HOJA. PERO EL FLAGELO TAMBIEN INDUCE LAS DEFENSAS DE LA PLANTA, POR LO QUE SU EXPRESION EN EL APOPLASTO ESTA REGULADA NEGATIVAMENTE. SIN EMBARGO, HEMOS DEMOSTRADO QUE LA EXPRESION FLAGELAR EN P. SYRINGAE TAMBIEN PRESENTA HETEROGENEIDAD, Y QUE PARTE DE LA POBLACION APOPLASTICA EXPRESA ALTOS NIVELES DE FLAGELINA, A PESAR DE SU INMUNOGENICIDAD. TAMBIEN HEMOS DEMOSTRADO QUE T3SS Y FLAGELO MUESTRAN CONTRARREGULACION RECIPROCA CON ENCENDIDO Y APAGADO INDEPENDIENTE, GENERANDOSE SUBPOBLACIONES SIMULTANEAS ON/ON, ON/OFF, OFF/ON Y OFF/OFF. LA ACTIVACION ESTOCASTICA DE EXPRESION GENICA EN POBLACIONES CLONALES PUEDE REGULARSE POR MECANISMOS EPIGENETICOS, COMO METILACION DE ADN. EL CARACTER RAPIDAMENTE REVERSIBLE DE LAS SUBPOBLACIONES DE P. SYRINGAE SUGIERE REGULACION EPIGENETICA. HEMOS DETERMINADO LOS METILOMAS DE DOS CEPAS MODELO DE P. SYRINGAE PATOGENAS DE JUDIA Y TOMATE, RESPECTIVAMENTE, E IDENTIFICADO VARIOS MOTIVOS DE METILACION, DIFERENTES EN CADA CEPA, ABUNDANTES EN PROMOTORES Y SOLAPANTES CON SITIOS DE UNION PARA FACTORES DE TRANSCRIPCION (TF). EL SOLAPAMIENTO ENTRE SITIOS DE METILACION Y DE UNION A TF ES TIPICO DE REGULACION EPIGENETICA DE LA EXPRESION GENICA CON CARACTER ESTOCASTICO. MUCHOS SITIOS DE METILACION EN LOS GENOMAS DE AMBAS CEPAS ESTAN HEMIMETILADOS O NO METILADOS, LO QUE SUGIERE SU PARTICIPACION EN LA REGULACION GENICA, Y ALGUNOS ESTAN LOCALIZADOS EN LOS PROMOTORES DE REGULADORES CLAVE DEL T3SS VINCULADOS POR NUESTRO EQUIPO A LA EXPRESION BIESTABLE DEL T3SS, Y PROBABLEMENTE IMPLICADOS EN LA REGULACION CRUZADA DE LA EXPRESION DE T3SS Y FLAGELO. CARACTERIZAREMOS EL PAPEL DE LAS METILASAS DE ADN EN LA REGULACION DE T3SS Y FLAGELO, Y EN LA GENERACION DE HETEROGENEIDAD FENOTIPICA DE LOCI RELACIONADOS CON LA VIRULENCIA EN P. SYRINGAE. LA ACTIVACION ESTOCASTICA DE LA EXPRESION GENICA GENERA HETEROGENEIDAD FENOTIPICA EN AUSENCIA DE DIFERENCIAS GENETICAS Y PUEDE TENER VALOR ADAPTATIVO. INVESTIGAREMOS EN PROFUNDIDAD EL VALOR ADAPTATIVO DE LA HETEROGENEIDAD FENOTIPICA COMBINADA DE T3SS Y FLAGELO: EL PAPEL DE LAS DIFERENTES SUBPOBLACIONES EN LA ADAPTACION A LA PLANTA BAJO DIVERSOS CONTEXTOS DE DEFENSA Y PATOSISTEMAS, Y LAS IMPLICACIONES DE LA HETEROGENEIDAD REGULADA PARA LA RESISTENCIA DE LA PLANTA Y PARA LAS ESTRATEGIAS DE CONTROL DE INFECCIONES. ISTEMAS DE SECRETION TIPO III\PROTECCION DE CULTIVOS\ADAPTACION\REGULACION GENICA\METILOMA\VIRULENCIA\BACTERIA PATOGENA\PLANTA HUESPED\EFECTORES