EFECTORES TIPO III DE PSEUDOMONAS SYRINGAE TYPE III: UNA APROXIMACION A LA GENET...
EFECTORES TIPO III DE PSEUDOMONAS SYRINGAE TYPE III: UNA APROXIMACION A LA GENETICA DE LA DEFENSA EN PLANTAS Y SU SUPRESION DESDE EL SECRETOMA
LOS EFECTORES TIPO III (T3E) SON PROTEINAS ESPECIALIZADAS QUE SE TRANSLOCAN AL INTERIOR DE LA CELULA HOSPEDADORA MEDIANTE UN SISTEMA DE SECRECION CONSERVADO EN NUMEROSOS PATOGENOS BACTERIANOS, Y QUE PROMUEVEN EL DESARROLLO DE ENFE...
LOS EFECTORES TIPO III (T3E) SON PROTEINAS ESPECIALIZADAS QUE SE TRANSLOCAN AL INTERIOR DE LA CELULA HOSPEDADORA MEDIANTE UN SISTEMA DE SECRECION CONSERVADO EN NUMEROSOS PATOGENOS BACTERIANOS, Y QUE PROMUEVEN EL DESARROLLO DE ENFERMEDAD EN LA PLANTA MEDIANTE LA SUPRESION DE SUS DEFENSAS, LOS T3E TAMBIEN PROMUEVEN RESISTENCIA SI SON RECONOCIDOS POR GENES ESPECIFICOS (GENES R), SIEMPRE QUE ESTA RESPUESTA NO SEA SUPRIMIDA POR OTRO T3E, POR TANTO LOS T3E JUEGAN UN PAPEL CLAVE EN EL DESARROLLO DE LA ENFERMEDAD Y EN EL ESTABLECIMIENTO DE RESISTENCIA, LOS DISTINTOS PATOVARES DE P, SYRINGAE SECRETAN UN NUMERO VARIABLE DE T3E, QUE CONSTITUYEN SU SECRETOMA, EL SECRETOMA DE LA ESTIRPE 1448A (P, SYRINGAE PV PHASEOLICOLA) CONSTA DE 24 T3E, INCLUYENDO AQUELLOS IDENTIFICADOS POR NUESTRO GRUPO, MIENTRAS QUE EL DE LA ESTIRPE DC3000 (P, SYRINGAE PV TOMATO) TIENE UNOS 40, MUCHOS T3E PUEDEN SUPRIMIR LAS DEFENSAS DE LA PLANTA, PERO COMO TAL ACTIVIDAD SE HA DEMOSTRADO MEDIANTE EXPRESION ECTOPICA O ENSAYOS IN VITRO, SE DESCONOCE SU IMPORTANCIA DURANTE LA INTERACCION CON LA PLANTA, CONOCER LA CONTRIBUCION DE LAS ACTIVIDADES DE SUPRESION DE DEFENSA DE T3E INDIVIDUALES AL DESARROLLO DE ENFERMEDAD O AL ESTABLECIMIENTO DE RESISTENCIA, Y ANALIZAR LAS RELACIONES FUNCIONALES ENTRE T3E DE UN DETERMINADO SECRETOMA, SON RETOS CLAVE DEL AREA, CON REPERCUSIONES EN EL DISEÑO DE ESTRATEGIAS DE CONTROL DE ENFERMEDAD,NUESTRA INVESTIGACION HA DEMOSTRADO QUE EL INDICE DE COMPETITIVIDAD (CI) CONSTITUYE UN ENSAYO DE VIRULENCIA MAS SENSIBLE QUE LOS ENSAYOS ESTANDAR, DICHO INCREMENTO EN SENSIBILIDAD NOS HA PERMITIDO DETECTAR NIVELES DE ATENUACION INAPRECIABLES EN ENSAYOS ESTANDAR, Y ASIGNAR FENOTIPOS A CIERTOS MUTANTES DE T3E PREVIAMENTE INDETERMINADOS, TAMBIEN HEMOS APLICADO ENSAYOS CI PARA CARACTERIZAR LA RESPUESTA DE DEFENSA INDUCIDA POR T3E TIPO HOPZ, AMPLIAMENTE REPRESENTADOS ENTRE PATOVARES DE P, SYRINGAE Y SIMILARES A PROTEASAS EUCARIOTAS UBIQUITIN-LIKE (ULP), HEMOS DEMOSTRADO QUE HOPZ1A INDUCE UNA RESPUESTA DE DEFENSA EN ARABIDOPSIS COL-0 INDEPENDIENTE DE LOS GENES R RPS2 Y RPS4, PERO QUE SIN EMBARGO MUESTRA ADITIVIDAD INCOMPLETA CON LAS RESPUESTAS DE DEFENSA FRENTE A LOS T3E AVRRPT2 O AVRRPS4 (MEDIADAS POR RPS2 Y RPS4, RESPECTIVAMENTE), NUESTROS RESULTADOS INDICAN QUE LA GENERACION DE MUTANTES DE T3E, COMBINADA CON LOS ENSAYOS CI, CONSTITUYE UNA PODEROSA HERRAMIENTA PARA ANALIZAR LA CONTRIBUCION DE T3E INDIVIDUALES A LA ENFERMEDAD O LA RESISTENCIA, TAMBIEN HEMOS DEMOSTRADO QUE PODEMOS DETERMINAR REDUNDANCIA FUNCIONAL ENTRE T3E, E IDENTIFICAR POSIBLES RELACIONES FUNCIONALES ENTRE DOS T3E CUALESQUIERA, UTILIZANDO UN ENSAYO CI MODIFICADO (COI), EN EL QUE SE CO-INOCULA CADA MUTANTE SIMPLE CON EL CORRESPONDIENTE DOBLE MUTANTE,CONSIDERANDO LO ANTERIOR, Y TENIENDO EN CUENTA QUE HEMOS GENERADO MUTANTES NULOS PARA CASI TODOS LOS T3E DEL SECRETOMA DE 1448A, PROPONEMOS CARACTERIZAR LA CONTRIBUCION DE CADA UNO DE LOS MIEMBROS DE DICHO SECRETOMA A LA VIRULENCIA Y/O AL ESTABLECIMIENTO DE RESISTENCIA EN PLANTA, UTILIZANDO NUESTRA COLECCION DE MUTANTES Y VECTORES DE EXPRESION, MUTANTES DE LA PLANTA AFECTADOS EN RESPUESTAS DE DEFENSA, Y APLICANDO ENSAYOS TIPO CI, COI Y ESTANDAR, LA MISMA ESTRATEGIA PERMITIRA ESTABLECER EL PAPEL DE LOS T3E TIPO HOPZ EN LA INTERACCION CON LA PLANTA: YA HEMOS GENERADO LOS MUTANTES NULOS, Y HEMOS DETERMINADO SUS PROBABLES DIANAS DE INTERACCION INCLUYENDO UBIQUITINA, SUMO, Y UNA PROTEINA ASOCIADA A DEFENSA FRENTE A PATOGENOS (SIMILAR A ARABIDOPSIS ELI3), PATOGENESIS\VIRULENCIA\SISTEMA DE SECRECION TIPO III\EFECTOR\PATOGENO BACTERIANO\INMUNIDAD INNATA EN PLANTAS\AVIRULENCIA\RESISTENCIA A PATOGENOS\GENES R\SUMOver más
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