Descripción del proyecto
LA FANEROGAMA MARINA POSIDONIA OCEANICA (L,) DELILE USA, COMO FUENTE DE CARBONO INORGANICO PARA LA FOTOSINTESIS, TANTO CO2 COMO HCO3-, EL INCREMENTO DE CO2 ACIDIFICA EL CITOPLASMA E HIPERPOLARIZA LA MEMBRANA DE LAS CELULAS DEL MESOFILO FOLIAR, MIENTRAS QUE EL INCREMENTO DE HCO3-, TRAS UNA ACIDIFICACION INICIAL, ALCALINIZA EL CITOPLASMA TANTO TIEMPO COMO DURA EL ENRIQUECIMIENTO EN HCO3-, ESTE RESULTADO EVIDENCIA QUE ESTE ION SE TRANSPORTA AL INTERIOR DE LAS CELULAS FOTOSINTETICAS MEDIANTE UN SIMPORTE CON PROTONES, EN EL CITOSOL, LA ENZIMA ANHIDRASA CARBONICA CATALIZA LA DESHIDRATACION DEL HCO3- PRODUCIENDO CO2, QUE DIFUNDE AL CLOROPLASTO Y ES ASIMILADO EN EL CICLO DE CALVIN, Y OH- QUE SON EXCRETADOS AL APOPLASTO A TRAVES DE CANALES ANIONICOS, TANTO EN EL CASO DEL INCREMENTO DE CO2, COMO DE HCO3- SE PONEN EN MARCHA MECANISMOS PARA LA HOMEOSTASIS DEL POTENCIAL DE MEMBRANA (EM) Y DEL PH CITOSOLICO (PHC) QUE TIENEN EN COMUN LA EXCRECION DE ANIONES, NUESTRO GRUPO DISPONE DE DATOS QUE MUESTRAN UNA DISMINUCION DE LA CONCENTRACION DE CL- EN EL CITOPLASMA EN RESPUESTA A LA ADICION DE HCO3-, QUE PARECE SEGUIR EL PATRON DE FUNCIONAMIENTO DE LOS CANALES ANIONICOS DE TIPO S, SORPRENDENTEMENTE, ESTOS CANALES SON MAS PERMEABLES A NO3- QUE A CL- (20:1) Y SE ACTIVAN EN CONDICIONES PARECIDAS A LAS EXISTENTES EN LAS CELULAS DEL MESOFILO FOLIAR DE P, OCEANICA, EN LUZ, DURANTE UN PULSO DE HCO3-, ES DECIR, ALTO HCO3-, BAJO CO2, PHC ALCALINO Y ALTO CA+2, LA ASIMETRIA DE LAS CONCENTRACIONES CITOSOL-AGUA DE MAR DE NO3- Y CL-, JUNTO CON EL EM DE ESTA ESPECIE (EN TORNO A -175 MV, DENTRO NEGATIVO) HACE QUE, ESPECIALMENTE EL NO3- ESTE SOMETIDO A UNA POTENTE FUERZA ION MOTRIZ DIRIGIDA HACIA EL EXTERIOR DE LA CELULA, ESTOS TRES FACTORES, (PERMEABILIDAD, REGULACION Y TERMODINAMICA DEL PROCESO) SUGIEREN QUE EL INCREMENTO DE CO2 Y DE HCO3- AFECTA A LA HOMEOSTASIS DE NO3- Y CL- DEL CITOPLASMA, EN CONSECUENCIA, EL OBJETIVO DE ESTE PROYECTO ES ESTUDIAR EL EFECTO DEL ALTO CO2 Y DEL ALTO HCO3- EN LA HOMEOSTASIS DE ANIONES (NO3- Y CL-) EN P, OCEANICA, SOMETIDA A SUFICIENCIA Y DEFICIENCIA DE NITROGENO, LA CONCENTRACION (ACTIVIDAD) DE NO3- Y CL- EN EL CITOSOL SE MEDIRA MEDIANTE ELECTRODOS ION SELECTIVOS, EN CUYO USO NUESTRO GRUPO TIENE UNA AMPLIA EXPERIENCIA, ASIMISMO, SE MEDIRA LA ACTIVIDAD DE CA+2 EN EL CITOPLASMA EN RESPUESTA A ALTO CO2 Y ALTO HCO3-, YA SEA MEDIANTE ELECTRODOS ION SELECTIVOS O MEDIANTE SONDAS FLUORESCENTES, POR OTRO LADO, MEDIANTE EL USO DE CAMARAS DE INCUBACION CERRADAS, SE PROPONE ESTUDIAR EL EFECTO DEL CO2 Y DEL HCO3-, FRENTE A CONDICIONES CONTROL, EN LOS PROCESOS DE INCORPORACION/EXCRECION DE NO3- Y LA ACTIVIDAD NITRATO REDUCTASA TANTO EN P, OCEANICA COMO EN ZOSTERA MARINA L,, Y CYMODOCEA NODOSA (UCRIA) ASCHERSON, UNO DE LOS MIEMBROS MAS IMPORTANTES DE LOS CANALES ANIONICOS DE TIPO S SON LOS CANALES SLAH3, PARA LOS CUALES NUESTRO GRUPO DISPONE DEL MUTANTE ATSLAH3 QUE EVIDENCIA UNA TOTAL PERDIDA DE FUNCION FRENTE A SU CONTROL GENETICO, ARABIDOPSIS THALIANA (COL 0), ASI, DE MANERA TENTATIVA, EN ESTE PROYECTO SE PROPONE ESTUDIAR EL EFECTO DEL CANAL ANIONICO SLAH3 EN LA HOMEOSTASIS ANIONICA (NO3- Y CL-) EN RESPUESTA A ALTO CO2 EN CELULAS EPIDERMICAS DE LA RAIZ DE A, THALIANA, HOMEOSTASIS DE NO3- Y CL-\[CA+2]C\CANALES ANIÓNICOS\MICROELECTRODOS ION SELECTIVOS\ALTO CO2 Y HCO3-\ANGIOSPERMAS MARINAS