Descripción del proyecto
La microscopía confocal es una tecnología básica para proyectos de biología celular que mejora la resolución en los campos fluorescentes, sobre todo en profundidad (Z), permitiendo reconstruciones 3D precisas, así como reduce la fototoxicidad y el fotoquemado, resultando en una óptima videomicroscopía de célula viva, En este proyecto se solicita un equipo básico de microscopía confocal láser, cuya configuración está definida para poder realizar microscopía de proteínas fluorescentes (variantes azul, verde, amarilla y roja) en célula viva, así como tinción del ADN con DAPI e inmunofluorescencia (IF) con los fluoróforos más utilizados en el mercado (p, ej, grupo Alexa Fluor), incluyendo los más recientes en el espectro infrarrojo, Para ello, el equipo solicitado incluye un microscopio invertido básico con cabezal de escaneo láser, cinco láseres (405, 488, 512, 552 y 638 nm) y tres detectores, dos de ellos de alta sensibilidad, especialmente diseñados para proteínas fluorescentes, Las aplicaciones fundamentales de este microscopio para los grupos solicitantes serán: (i) videomicroscopía multicolor de levaduras y células de mamífero vivas (CFP, GFP, YFP, RFP), incluyendo experimentos IRIF, FRAP y FLIP; y (ii) inmunofluorescencia de células y tejidos humanos, incluyendo cultivos primarios, El microscopio confocal se ubicará en un espacio específico dedicado a la microscopía en la Unidad de Investigación del Hospital Universitario Nuestra Señora de Candelaria,