Descripción del proyecto
LOS VIRUS SON LOS AGENTES BIOLOGICOS MAS ABUNDANTES EN LA BIOSFERA, EL CONOCIMIENTO DE LA INTERACCION DE ESTOS AGENTES CON LAS CELULAS QUE INFECTAN TIENE UN ENORME INTERES CIENTIFICO TANTO BASICO COMO APLICADO, PARA PROTEGERSE FRENTE A LA INFECCION POR VIRUS, Y OTROS AGENTES INFECCIOSOS EXTERNOS, LOS MICROORGANISMOS HAN DESARROLLADO DIFERENTES MECANISMOS, EN LA MAYORIA DE ARQUEAS Y CASI EL 50% DE BACTERIAS SE DETECTAN SISTEMAS CRISPR-CAS QUE CONFIEREN INMUNIDAD ADAPTATIVA, CRISPR HACE REFERENCIA A LOCI QUE CONTIENEN SECUENCIAS CORTAS REPETIDAS Y CON CARACTER PALINDROMICO QUE ESTAN SEPARADAS POR FRAGMENTOS CONOCIDOS COMO ESPACIADORES, LOS ESPACIADORES SON ADQUIRIDOS EN LA FASE DE ADAPTACION O INMUNIZACION A PARTIR DE ELEMENTOS GENETICOS MOVILES EXTRAÑOS CONSTITUYENDO UNA MEMORIA DE INFECCIONES PREVIAS, LAS PROTEINAS CAS1 Y CAS2, CODIFICADAS POR GENES ADYACENTES AL LOCUS CRISPR, PARTICIPAN EN ESA FASE DE INMUNIZACION, LAS SECUENCIAS CRISPR SON TRANSCRITAS Y PROCESADAS GENERANDO PEQUEÑOS CRRNAS (DE CRISPR-RNAS), EN UNA FASE POSTERIOR DE INTERFERENCIA, EL CRRNA COMPLEMENTARIO A UNA SECUENCIA DIANA EN EL ELEMENTO GENETICO EXTRAÑO, DIRIGIRA A UNAS PROTEINAS CAS CON ACTIVIDAD NUCLEASA QUE DEGRADARAN DICHO ELEMENTO,SE ESTA DESCRIBIENDO UNA CADA VEZ MAYOR DIVERSIDAD DE SISTEMAS CRISPR, A PARTIR DE UNO DE ESTOS TIPOS SE HA CARACTERIZADO LA NUCLEASA CAS9, ESTA SE HA ADAPTADO PARA LA EDICION GENOMICA DE ORGANISMOS SUPERIORES, LO QUE HA SUPUESTO UNA ENORME REVOLUCION EN LAS CIENCIAS BIOMEDICAS, EL POTENCIAL BIOTECNOLOGICO QUE PUEDE DERIVARSE DE LA CARACTERIZACION DE TIPOS ADICIONALES DE SISTEMAS CRISPR-CAS Y DEL ESTUDIO DE SU MECANISMO DE ACTUACION ES ENORME, EN ALGUNOS MICROORGANISMOS SE HA DESCRITO LA EXISTENCIA DE PROTEINAS CAS1 QUE PRESENTAN UN DOMINIO RETROTRANSCRIPTASA (RT-CAS1), EN LA BACTERIA MARINA MARINOMONAS MEDITERRANEA SE HA DESCRITO UN SISTEMA III-B CON RT-CAS1 QUE PERMITE LA ADQUISICION DE ESPACIADORES A PARTIR DE RNA (SILAS ET AL, 2016, SCIENCE, V, 351, P, AAD4234), LA FUNCION BIOLOGICA DEL PROCESO DE RETROTRANSCRIPCION ES DESCONOCIDA, EL OBJETIVO DE ESTE PROYECTO ES PROFUNDIZAR EN LA CARACTERIZACION DE SISTEMAS CON RT-CAS1 Y SU PAPEL EN LA DEFENSA FRENTE A DIVERSOS TIPOS DE FAGOS, TANTO DE DNA COMO DE RNA, SE PRESTARA UNA ATENCION ESPECIAL A SU POSIBLE PAPEL EN LA INMUNIDAD CONTRA VIRUS DE RNA PUESTO QUE LA INTERACCION DE SISTEMAS CRISPR-CAS CON FAGOS CON ESTE TIPO DE MATERIAL GENETICO ES DESCONOCIDA EN GRAN MEDIDA, EL ESTUDIO INCLUIRA EL ANALISIS DEL PAPEL DE LAS PROTEINAS CODIFICADAS EN EL OPERON CAS EN LAS FASES DE INTERFERENCIA Y DE ADAPTACION, FINALMENTE, SE ESTUDIARA LA INTERACCION ENTRE SISTEMAS CRISPR-CAS DE DIFERENTES TIPOS QUE COEXISTEN EN UN MISMO MICROORGANISMO, ENTRE LOS ASPECTOS QUE SE CONSIDERARAN SE INCLUYE EL ESTUDIO DE LA POSIBLE REGULACION DIFERENCIAL DE LOS DISTINTOS TIPOS, LO QUE PODRIA CONFERIR RESISTENCIA COMPLEMENTARIA A FAGOS DEPENDIENDO DE LAS CONDICIONES FISIOLOGICAS, EL PROYECTO QUE SE PRESENTA PUEDE CONTRIBUIR DE FORMA SIGNIFICATIVA A LA AMPLIACION DEL CONOCIMIENTO SOBRE LA DIVERSIDAD FUNCIONAL Y ESTRUCTURAL DE LOS SISTEMAS CRISPR-CAS, ESTE ES UNO DE LOS TEMAS DE MAYOR RELEVANCIA CIENTIFICA EN LA ACTUALIDAD POR SUS ENORMES IMPLICACIONES EN DIVERSOS AMBITOS BIOMEDICOS Y BIOTECNOLOGICOS, RISPR-CAS\RETROTRANSCRIPTASA\FAGOS\RNA\BACTERIAS MARINAS