Descripción del proyecto
EN ATREOVO ANALIZAREMOS LOS MECANISMOS CELULARES/MOLECULARES QUE RIGEN LA ATRESIA (ATRE) OVOCITARIA (OVO) EN 3 ESPECIES DE PECES, DESARROLLANDO HERRAMIENTAS PARA SU IDENTIFICACION TEMPRANA Y PARA CALCULAR LA FECUNDIDAD DE POBLACIONES PISCICOLAS, LA PRODUCTIVIDAD Y LA CAPACIDAD DE RECUPERACION DE UNA POBLACION DEPENDEN DE SU CAPACIDAD DE PRODUCIR SUFICIENTES HUEVOS DE CALIDAD POR CICLO REPRODUCTIVO, LOS PROCESOS DE DIFERENCIACION/MADURACION DE OVOCITOS SON CONTROLADOS POR VARIABLES AMBIENTALES, QUE PERMITEN A UNA HEMBRA DESVIAR PARTE DE SU GASTO ENERGETICO A LA ACUMULACION DE MACROMOLECULAS Y EL CRECIMIENTO OVO, ENTRE TALES MOLECULAS ENCONTRAMOS EL 5S RRNA EN OVOCITOS PREVITELOGENICOS (75% DEL ARN TOTAL EN OVOCITOS PERINUCLEOLARES), LA DIFERENCIACION PUEDE TERMINAR CON LA PUESTA EXITOSA DE HUEVOS COMPLETAMENTE MADUROS, O DETENERSE POR ATRE EN CUALQUIER MOMENTO A LO LARGO DEL PROCESO, ESTE FENOMENO DE ATRE, Y LA REABSORCION POSTERIOR DE ENERGIA, PERMITEN LA SUPERVIVENCIA DE LA HEMBRA A EXPENSAS DE SU PROPIA FERTILIDAD, EN PESQUERIAS, LA ATRE OVO, PUEDE AFECTAR GRAVEMENTE AL CALCULO DE LA FECUNDIDAD Y, POR TANTO, A LA DINAMICA POBLACIONAL, EN ACUICULTURA, POR OTRA PARTE, LAS CONDICIONES DE CULTIVO SUBOPTIMOS PUEDEN DESENCADENAR ATRE, QUE DEBE SER MONITORIZADA EN LAS ESPECIES DONDE EL OBJETIVO ES LA PRODUCCION DE HUEVAS,NO HAY SUFICIENTE INFORMACION EN RELACION CON LOS MECANISMOS MOLECULARES Y CELULARES QUE REGULAN LA ATRE OVO, PERO PARECE SER REGULADA POR APOPTOSIS Y AUTOFAGOCITOSIS, EN ESTE CONTEXTO, Y TENIENDO EN CUENTA LAS MOLECULAS RIBOSOMALES ACUMULADAS EN OVOCITOS DE PECES, NUESTRA HIPOTESIS ES QUE, COMO EN CELULAS DE MAMIFERO BAJO ESTRES RIBOSOMAL, 5SRRNA PODRIA (A NIVEL MOLECULAR) REGULAR AMBOS PROCESOS DE MUERTE CELULAR PROGRAMADA (MCP), EL COMPLEJO RNP FORMADO POR 5SRRNA Y LAS PROTEINAS RIBOSOMALES RPL5 Y RPL11 EN EL CITOSOL, SE INCORPORA AL NUCLEOLO PARA FORMAR LA SUBUNIDAD RIBOSOMICA GRANDE, PERO SI ALGO INTERFIERE EN EL PROCESO, EL COMPLEJO UNE LA UBIQUITINA LIGASA MDM2, QUE MEDIA LA PROTEOLISIS CONSTITUTIVA DE P53, POR TANTO, P53 SE LIBERA Y SE ACUMULA EN LA CELULA PARA MEDIAR LOS PROCESOS MOLECULARES QUE CONDUCEN A LA APOPTOSIS O AUTOFAGOCITOSIS,TRABAJANDO CON LA ESPECIE MODELO D, RERIO, IDENTIFICAREMOS MARCADORES MOLECULARES DE ALERTA TEMPRANA DE ATRE, QUE LUEGO SE APLICARAN EN UNA ESPECIE RELEVANTE EN PESQUERIAS (MERLUZA, M, MERLUCCIUS) Y UNA ESPECIE CON POSIBILIDADES EN ACUICULTURA Y RELEVANTE COMO CENTINELA DE LA SALUD AMBIENTAL (MUBLE C, LABROSUS), ACTIVAREMOS LA ATRE EN EL LABORATORIO POR PRIVACION DE ALIMENTO EN EL PEZ CEBRA Y EL MUBLE, MIENTRAS QUE PARA LA MERLUZA DEPENDEREMOS DE MUESTRAS RECOGIDAS DESDE 2001, EN CAMPAÑAS ANUALES DE ANALISIS DE LA FECUNDIDAD EN EL GOLFO DE BIZKAIA, ESTUDIAREMOS LA ATRE A NIVEL CELULAR/HISTOLOGICO CON EL ENSAYO TUNEL Y EL ANALISIS HISTOQUIMICO DE ENZIMAS LISOSOMICAS, EL TRANSCRIPTOMA ATRETICO SERA ESTUDIADO POR RNASEQ, CON UN ENFASIS ESPECIAL EN EL ANALISIS DE LA REGULACION DE 5SRRNA, RPL5, RPL11, P53, MDM2 Y DE GENES MARCADORES DE APOPTOSIS/FAGOCITOSIS, LA UNION DE 5SRRNA A MDM2 Y LA LIBERACION DE P53 SE ESTUDIARAN MEDIANTE FLIM-FRE) CON ANTICUERPOS ANTI-PEZ CEBRA, Y SE GENERARA UN ENSAYO DE ALTO RENDIMIENTO CON EXPLANTES DE OVARIO PARA ESTUDIAR LAS CONDICIONES DESENCADENANTES DE ATRE,LOS RESULTADOS DE ATREOVO SERAN APLICABLES EN EL ESTUDIO DE LA DINAMICA DE POBLACIONES EN PESQUERIAS Y EN EL SEGUIMIENTO DE LAS CONDICIONES DE CULTIVO EN LAS PISCIFACTORIAS QUE PRODUCEN HUEVAS, ATRESIA OVOCITARIA\FECUNDIDAD EN PECES\APOPTOSIS\AUTOFAGOCITOSIS\HERRAMIENTAS DE ALERTA TEMPRANA\5S RRNA\P53