Descripción del proyecto
LOS VIRUS RESPIRATORIOS PRODUCEN EPIDEMIAS QUE SE PROPAGAN RAPIDAMENTE DENTRO DE LAS COMUNIDADES Y A TRAVES DEL PLANETA, LA LUCHA CONTRA ESTAS ENFERMEDADES REQUIERE UN ENFOQUE MULTIFACETICO BASADO EN TRES PILARES, PREVENCION MEDIANTE VACUNACION, DIAGNOSTICO PRECOZ Y TRATAMIENTO OPORTUNO, SIN EMBARGO, LA RAPIDA TRANSMISION DEL SARS-COV-2 DURANTE LA PANDEMIA ACTUAL HA PUESTO DE MANIFIESTO LA FALTA DE HERRAMIENTAS ADECUADAS PARA UN DIAGNOSTICO EFICAZ EN EL PUNTO DE ATENCION AL PACIENTE (POC), QUE DEBERIAN PODERSE PRODUCIR DE FORMA FACIL, RAPIDA Y ECONOMICA A GRAN ESCALA EN RESPUESTA A UNA EMERGENCIA SANITARIA MUNDIAL DE ESTE TIPO, HOY EN DIA, EL METODO MAS SENSIBLE PARA LA DETECCION DE VIRUS RESPIRATORIOS ES LA REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA MEDIDA EN TIEMPO REAL (RT-PCR), QUE DETECTA EL ACIDO NUCLEICO VIRAL, SIN EMBARGO, LA RT-PCR ES UNA TECNICA SOFISTICADA Y COSTOSA QUE DEBE SER REALIZADA POR PERSONAL ALTAMENTE CAPACITADO EN INSTALACIONES CENTRALIZADAS, COMO ALTERNATIVA, LAS PRUEBAS DE DETECCION RAPIDA DE ANTIGENOS (RDTS) SON ECONOMICAS Y PROPORCIONAN DETECCION RAPIDA Y SENCILLA, PERO MUESTRAN BAJA SENSIBILIDAD Y REQUIEREN INTERPRETACION SUBJETIVA DE LOS RESULTADOS, ESPECIALMENTE CUANDO LAS UTILIZA PERSONAL NO ESPECIALMENTE CAPACITADO,EN ESTE PROYECTO PRODUCIREMOS INMUNOENSAYOS DE UN SOLO PASO, RAPIDOS Y ULTRASENSIBLES, PARA LA DETECCION DE VIRUS RESPIRATORIOS CON MINIMA INTERVENCION DEL USUARIO, EL DESARROLLO DEL ENSAYO SE BASARA EN EL USO DE MICRO/NANOPARTICULAS MAGNETICAS Y AMPLIFICADORES DE SEÑAL ENZIMATICOS, UNA ESTRATEGIA QUE HEMOS USADO ANTES PARA DETECTAR BIOMARCADORES DE CANCER, ICTUS Y MALARIA EN 15-40 MIN Y, QUE EN EL CASO DE MALARIA, GENERO LIMITES DE DETECCION COMPARABLES A LOS DEL ELISA CLASICO Y LA RT-PCR DE REFERENCIA, ESTOS ENSAYOS, QUE INCLUIRAN SOLO DOS INCUBACIONES CORTAS (DE LA MUESTRA CON UN COCTEL DE REACTIVOS Y DE LOS MAGNETO-INMUNOCOMPLEJOS FORMADOS CON UNA SOLUCION DE SUSTRATO ENZIMATICO PARA LA DETECCION), SERAN MAS FACILES DE AUTOMATIZAR QUE LOS FORMATOS CLASICOS DE MULTIPLES PASOS, Y NO OBSTANTE, PROPORCIONARAN DETECCION CUANTITATIVA EN UN AMPLIO RANGO DE CONCENTRACIONES DE ANALITO,PARA LOGRAR ESTE OBJETIVO, NOS CENTRAREMOS EN 4 OBJETIVOS PRINCIPALES:1, OPTIMIZACION DE MAGNETO-INMUNOENSAYOS DE UN SOLO PASO PARA LA DETECCION DE ANTIGENOS DE TRES VIRUS RESPIRATORIOS CLAVE: INFLUENZA, VIRUS RESPIRATORIO SINCITIAL (RSV) Y CORONAVIRUS 2 DEL SINDROME RESPIRATORIO AGUDO SEVERO (SARS-COV-2),2, OPTIMIZACION DEL PRETRATAMIENTO DE MUESTRAS CLINICAS Y LISIS DEL VIRUS PARA UN RENDIMIENTO OPTIMO DEL MAGNETO-INMUNOENSAYO,3, AUTOMATIZACION DE LOS MAGNETO-INMUNOENSAYOS USANDO UN DISPOSITIVO LAMINADO DE BAJO COSTE Y DETECCION ELECTROQUIMICA EN LA PLATAFORMA CMOS DESARROLLADA EN EL SUBPROYECTO 1, PARA LOGRAR DETECCION ULTRASENSIBLE Y CUANTITATIVA,4, VALIDACION DE LA TECNOLOGIA MEDIANTE EL ESTUDIO DE MUESTRAS CLINICAS RETROSPECTIVAS,EL OBJETIVO FINAL SERA LOGRAR LA CUANTIFICACION DE LOS TRES VIRUS EN TIEMPOS DE ENSAYO DE 15-30 MIN, PERO CON LIMITES DE DETECCION POR LO MENOS UN ORDEN DE MAGNITUD INFERIORES A LOS ALCANZADOS POR LOS RDTS DISPONIBLES EN LA ACTUALIDAD (NORMALMENTE SUPERIORES A 100 VIRUS POR ML DE MUESTRA),CON LOD<0,1 NG/ML, EN ESTAS CONDICIONES, SERA POSIBLE UTILIZAR ESTAS PRUEBAS DE ANTIGENOS EN MUESTRAS OBTENIDAS DE FORMA MENOS INVASIVA QUE EL ESTANDAR ACTUAL (FLUIDOS ORONASALES EN LUGAR DE ESPECIES NASO/OROFARINGEAS), ALCANZANDO LOS REQUISITOS DEL TESTADO POC DE VIRUS RESPIRATORIOS, VIRUS RESPIRATORIOS\INMUNOENSAYO\INMUNOSENSOR ELECTROQUIMICO\PARTICULAS MAGNETICAS\AMPLIFICADOR DE SEÑAL\ENSAYO RAPIDO\DIAGNOSTICO POINT-OF-CARE (POC)\VIRUS INFLUENZA\VIRUS RESPIRATORIO SINCITIAL (RSV)\CORONAVIRUS 2 DEL SINDROME RESPIRATORIO