Descripción del proyecto
LOS ANTICUERPOS SE EMPLEAN EN BIOANALISIS COMO ELEMENTOS DE RECONOCIMIENTO EN INMUNOENSAYOS LIGADOS A ENZIMAS (ELISA) E INMUNOSENSORES. CON EL FIN DE AMPLIFICAR LA SEÑAL, LOS ANTICUERPOS SE UNEN A LAS ENZIMAS DIRECTAMENTE O MEDIANTE INTERACCIONES ESTREPTAVIDINA-BIOTINA. EN CUALQUIER CASO, ESTE PROCEDIMIENTO REQUIERE LA UNION COVALENTE DE ANTICUERPOS A OTRAS MOLECULAS PEQUEÑAS O MACROMOLECULAS. TAMBIEN SE HAN EMPLEADO ANTICUERPOS EN EL DESARROLLO DE FARMACOS INMUNOCONJUGADOS (ADCS) PRODUCIDOS POR LA UNION COVALENTE DE FARMACOS CITOTOXICOS CONTRA EL CANCER, QUE DEMUESTRAN UNA ALTA SELECTIVIDAD HISTOLOGICA Y UNA TOXICIDAD SISTEMATICA REDUCIDA. LA CONJUGACION DE LA CARGA UTIL EN ANTICUERPOS REQUIERE UNA MOLECULA DE UNION CON GRUPOS ACTIVOS QUE SEAN CAPACES DE FORMAR ENLACES COVALENTES ENTRE LOS GRUPOS NH2- O HOOC- DE LOS ANTICUERPOS Y LOS GRUPOS FUNCIONALES DE LOS COMPUESTOS DE LA CARGA UTIL. EN LA MAYORIA DE LOS CASOS, ESTE PROCESO DA COMO RESULTADO CONJUGADOS UNIDOS ALEATORIAMENTE EN LOS QUE SE DAÑAN LAS REGIONES FAB Y FC DE LOS ANTICUERPOS. EN TRABAJOS ANTERIORES, LOGRAMOS PRODUCIR IGG PORTADORES DE NANOCLUSTERS (NCS), APARENTEMENTE, EN LA REGION DE CENTRAL BISAGRA DE LOS ANTICUERPOS. ADEMAS, DEMOSTRAMOS QUE ESTOS NCS ESTAN ACCESIBLES PARA COMPUESTOS QUE CONTIENEN TIOL. POR LO TANTO, NUESTRA HIPOTESIS NUMERO 1 ES: LOS ANTICUERPOS QUE PORTAN NCS EN LA REGION BISAGRA PUEDEN MODIFICARSE CON MOLECULAS TIOLADAS MEDIANTE LA FORMACION DE UN ENLACE TIOL-ORO. LOS GRUPOS TIOL NO MODIFICARAN LAS REGIONES FAB Y FC DE LOS ANTICUERPOS EN NUESTRAS CONDICIONES EXPERIMENTALES. LOS ANTICUERPOS ACTIVOS QUE PORTAN NCS DE METALES NOBLES SE CONVERTIRAN EN UNA VALIOSA PLATAFORMA PARA LA SINTESIS DE CONJUGADOS ANTICUERPO-MOLECULA ORGANICA ADECUADOS PARA LA PRODUCCION DE NUEVAS IGG CON ACTIVIDAD CATALITICA MEJORADA Y ADCS. POR OTRO LADO, EL DIAMETRO MEDIO DE LOS NCS METALICOS PRODUCIDOS EN LAS IGG ES DE ALREDEDOR DE 1.7 NM, LO QUE SE ACERCA BASTANTE AL DIAMETRO DE LAS SEMILLAS DE ORO (2 NM) EMPLEADAS PARA LA SINTESIS DE NANOOBJETOS DE DIFERENTES FORMAS Y MORFOLOGIAS, COMO NANOCUBOS, NANOVARILLAS, NANOPRISMAS, NANOESTRELLAS, ETC. LAS NC-IGG METALICAS PUEDEN INMOVILIZARSE ESPECIFICA Y SELECTIVAMENTE EN DIFERENTES SUPERFICIES PREMODIFICADAS CON LOS RESPECTIVOS ANTIGENOS. LA SUPERFICIE EXPUESTA DE LAS NC PRODUCIDAS POR LA METALIZACION IMPULSADA POR ANTICUERPOS TODAVIA ESTA DISPONIBLE PARA LA INTERACCION CON OTRAS MOLECULAS ORGANICAS E INORGANICAS. LA HIPOTESIS NUMERO 2 ES: LOS NCS METALIZADOS EN IGG PUEDEN USARSE COMO SEMILLAS PARA UN MAYOR CRECIMIENTO EN PRESENCIA DE IONES METALICOS, AGENTES REDUCTORES Y TENSIOACTIVOS PARA PRODUCIR NANOOBJETOS LIBRES O INMOVILIZADOS SELECTIVAMENTE DE DIFERENTES FORMAS Y MORFOLOGIAS. LOS ANTIGENOS PODRAN MODULAR LA VELOCIDAD DE CRECIMIENTO Y / O LA MORFOLOGIA DE LOS NANOOBJETOS RESULTANTES. LOS OBJETIVOS GENERALES DEL PROYECTO SON: (1) DESARROLLAR METODOS NOVEDOSOS PARA LA MODIFICACION DE ANTICUERPOS CON DIFERENTES MOLECULAS DE CARGA UTIL UTILIZANDO INTERACCIONES ESPECIFICAS ENTRE LA SUPERFICIE DE LAS NCS PREMETALIZADAS EN IGG; (2) CARACTERIZAR LA CARGA CON MOLECULAS DE CARGA UTIL Y LA ACTIVIDAD DE LOS ANTICUERPOS MODIFICADOS RESULTANTES CON EL FIN DE DEFINIR LAS CONDICIONES EXPERIMENTALES OPTIMAS PARA LA SINTESIS DE CONJUGADOS DE ANTICUERPOS; (3) DEMOSTRAR QUE LOS NCS PREMETALIZADOS EN IGG PUEDEN USARSE COMO SEMILLAS PARA EL CRECIMIENTO DE NANOPARTICULAS METALICAS LIBRES E INMOVILIZADAS DE DIFERENTES FORMAS Y MORFOLOGIA. ANOCLUSTERS\ANTICUERPO\FARMACO INMUNOCONJUGADO\BIOSENSOR\INMUNOENSAYO\ADN CATALITICO