Descripción del proyecto
EN ESTE PROYECTO, LA UPV/EHU UTILIZARA LOS SARN ASOCIADOS AL ESTRES ENCONTRADOS Y CARACTERIZADOS EN LOS OTROS DOS PROYECTOS (CSIC Y UPV) COMO BIOMARCADORES ESPECIFICOS PARA EL DESARROLLO DE SENSORES DE PUNTO DE NECESIDAD BASADOS EN DISPOSITIVOS ANALITICOS MICROFLUIDICOS EN PAPEL (MICROPAD). LOS DISPOSITIVOS FINALES SE UTILIZARAN PARA LA DETECCION TEMPRANA, FACIL Y DE BAJO COSTO DEL DAÑO INDUCIDO POR CONDICIONES DE ESTRES EN LOS CULTIVOS, EN PARTICULAR EN LAS PLANTAS DE TOMATE. PARA ELLO, PRIMERO INVESTIGAREMOS EL DISEÑO Y LA FABRICACION DE LOS MICROPAD CON LAS CARACTERISTICAS ESPECIFICAS QUE CUMPLAN CON LOS CRITERIOS ASSURED, SIGLAS EN INGLES, (AFFORDABLE, SENSITIVE, SPECIFIC, USER-FRIENDLY, RAPID, EQUIPMENT FREE AND DELIVERED (PEQUEÑO Y PORTATIL)) Y ESO PERMITIRA LA GENERACION DE DISPOSITIVOS SENSORES DE PUNTO DE NECESIDAD PARA LA AGRICULTURA. LOS MICROPAD SE FABRICARAN MEDIANTE METODOS DE IMPRESION DE CERA UTILIZANDO DIFERENTES SUSTRATOS. LUEGO, SE GENERARA UN CARTUCHO PARA CONTENER EL DISPOSITIVO. FINALMENTE, SE INVESTIGARA LA MANIPULACION DE LA MUESTRA EN EL DISPOSITIVO MEDIANTE LA INTEGRACION DE BOMBAS MICROFLUIDICAS AUTOALIMENTADAS PARA SUPERAR LAS LIMITACIONES FLUIDICAS QUE OFRECEN LOS DISPOSITIVOS DE PAPEL CONVENCIONALES.DESPUES, INVESTIGAREMOS LA INTEGRACION DEL ENSAYO PARA DETECTAR SIN-SARNS, COMO PRUEBA DE CONCEPTO. SE SEGUIRA UN ENFOQUE HOLISTICO PARA LA INTEGRACION, CONSIDERANDO PRIMERO LA ABUNDANCIA DE LOS SARN PROPUESTOS POR LOS OTROS MIEMBROS EN LAS MUESTRAS REALES PROCESADAS Y SEGUNDO, EL METODO DE DETECCION OPTICA MAS ADECUADO, COLORIMETRICO. EL ENSAYO SE ENCAPSULARA EN UNA MATRIZ POLIMERICA (ALGINATO, IONOGELES) Y LUEGO SE INTEGRARA EN LOS MICROPADS. SE DESARROLLARA UN ENSAYO COLORIMETRICO BASADO EN ARNZIMA PARA EL INTERROGATORIO DE LAS MUESTRAS. ADEMAS, SE SEGUIRAN DIFERENTES ENFOQUES PARA EL TRANSDUCTOR, TALES COMO: (1) INTERROGACION A SIMPLE VISTA PARA OBTENER UNA RESPUESTA CUALITATIVA; (2) ANALISIS DE COLOR DE IMAGENES TOMADAS POR UN TELEFONO MOVIL EN UN ENTORNO CONTROLADO Y (3) DISPOSITIVO OPTICO INTEGRADO BASADO EN UN SISTEMA LED/FOTODIODO, AMBOS PROPORCIONANDO VALORES CUANTITATIVOS.POSTERIORMENTE, INVESTIGAREMOS EL RENDIMIENTO DE LOS DISPOSITIVOS DE MICROFLUIDICOS. PARA ELLO, SE REALIZARA UNA EVALUACION SISTEMATICA DE SU EXACTITUD, PRECISION Y VERACIDAD, CUANDO SEA POSIBLE, ASEGURANDO EL EXITO DEL DISPOSITIVO Y, POR TANTO, SU POSTERIOR DESARROLLO HACIA UN PRODUCTO COMERCIALIZABLE. ADEMAS, SE EVALUARAN SUS LIMITES DE DETECCION Y CUANTIFICACION Y SU REPRODUCIBILIDAD. DEBE TENERSE EN CUENTA QUE ESTE PROYECTO NO ES UN BLOQUE DE TRABAJO MONOLITICO, POR LO QUE SE SEGUIRA UN PROTOCOLO ITERATIVO PROBANDO LOS DISPOSITIVOS, DURANTE TODO EL PRIMER AÑO Y MEDIO DEL PROYECTO, PARA LLEGAR AL PROTOTIPO FINAL DESEADO. FINALMENTE, EL DISPOSITIVO SERA VALIDADO EN CAMPO CON MUESTRAS REALES Y EN LABORATORIO POR EL GRUPO DEL CSIC UTILIZANDO TECNICAS CONVENCIONALES BIEN ESTABLECIDAS PARA SU COMPARACION.