Descripción del proyecto
LA ENCINA, QUERCUS ILEX L., Y EL ALCORNOQUE, Q. SUBER L., DOS DE LAS FAGACEAS MAS REPRESENTATIVAS DEL BOSQUE MEDITERRANEO, SUFREN UN DECAIMIENTO PROGRESIVO, DEBIDO FUNDAMENTALMENTE, A LA ENFERMEDAD DE "LA SECA", PRODUCIDA POR LA CONCURRENCIA DE FACTORES ABIOTICOS Y BIOTICOS (PHYTOPHTHORA CINNAMOMI, DIPLODIA MULILA Y BISCOGNIAUXIA MEDITERRANEA). LA ENCINA, DENTRO DE LAS FAGACEAS, SE MUESTRA COMO UNA ESPECIE ESPECIALMENTE RECALCITRANTE A LA MICROPROPAGACION. LA INTEGRACION DE ESTA TECNOLOGIA EN LOS PROGRAMAS DE MEJORA GENETICA, UTILIZANDO MATERIAL ADULTO, OFRECE UNA GRAN VENTAJA PARA LA RAPIDA PROPAGACION DE GENOTIPOS SELECCIONADOS QUE PUEDAN SER UTILIZADOS EN REFORESTACION. ARBOLES ELITE DE ENCINA TOLERANTES A LA SECA SERAN CLONADOS MEDIANTE LA PROLIFERACION DE YEMAS AXILARES CON EL FIN DE OBTENER PLANTAS TOLERANTES A LA ENFERMEDAD, Y POR OTRO LADO PARA DISPONER DE UNA FUENTE CONTINUA DE EXPLANTOS INICIALES PARA LA INDUCCION DE EMBRIOGENESIS SOMATICA (ES). EN LA PRESENTE PROPUESTA SE EVALUARA LA CAPACIDAD DE NUDOS Y ENTRENUDOS PARA INDUCCION DE ES FRENTE A LOS APICES CAULINARES, EXPLANTO MAS REACTIVO EN TRABAJOS PREVIOS. PARA EL MANTENIMIENTO DE LOS CULTIVOS EMBRIOGENICOS SE DEFINIRAN PROTOCOLOS PARA LAS FASES DE MULTIPLICACION, MADURACION-GERMINACION Y ACLIMATACION QUE NOS PERMITAN GENERAR MATERIAL PARA LA CONSECUCION DE LOS OBJETIVOS 2 Y 3. SE VERIFICARA EL REJUVENECIMIENTO SUFRIDO POR EL MATERIAL ADULTO TRAS SU PASO POR LA ES COMPARANDO CULTIVOS DE IGUAL GENOTIPO ESTABLECIDOS A PARTIR DEL ARBOL Y LOS DE LOS BROTES RESULTANTES DE LA GERMINACION DE LOS ES.UNA VALIOSA ALTERNATIVA PARA COMPLEMENTAR LOS PROGRAMAS DE MEJORA ES LA TRANSFORMACION GENETICA (TG), POR ESE MOTIVO EL SEGUNDO OBJETIVO SE REFIERE A LA OBTENCION DE PLANTAS TRANSGENICAS DE ALCORNOQUE Y ENCINA TOLERANTES A LA SECA", AUNQUE A NIVEL DEL PRESENTE PROYECTO SOLO SE PRETENDE GENERAR CONOCIMIENTO SOBRE LA TG DE ESTAS ESPECIES. SE ABORDARA LA INCORPORACION SIMULTANEA (CO-TRANSFORMACION) DE LOS GENES CSTL1/CSCH3, AISLADOS EN CASTAÑO EUROPEO Y QUE CODIFICAN RESPECTIVAMENTE UNA TAUMATINA Y UNA QUITINASA. POR OTRO LADO, LOS ES SERAN TRANSFORMADOS CON EL GEN CRRSP38 QUE CODIFICA UNA PROTEINA RICA EN CISTEINA Y QUE HA SIDO AISLADO EN CASTAÑO JAPONES. LOS TRES GENES CODIFICAN PROTEINAS ANTIFUNGICAS INCLUIDAS EN DIFERENTES FAMILIAS DE LAS PROTEINAS RELACIONADAS CON LA PATOGENESIS, SI BIEN LAS DOS PRIMERAS TIENEN UNA ACTIVIDAD ANTIFUNGICA GENERAL, MIENTRAS QUE LA PROTEINA RICA EN CISTEINA SE PRODUCE EN REPUESTA A LA INFECCION CON P. CINNAMOMI. LA TG SE LLEVARA A CABO EN LINEAS DE ENCINA Y ALCORNOQUE ADULTO SENSIBLES A LA SECA SELECCIONADAS POR PRODUCCION, LO QUE EN EL FUTURO SUPONDRIA DISPONER DE GENOTIPOS SELECCIONADOS DE AMBAS ESPECIES CON UN VALOR AÑADIDO POR SU TOLERANCIA/RESISTENCIA A LA ENFERMEDADLA CRICONSERVACION O ALMACENAMIENTO DEL MATERIAL EN NITROGENO LIQUIDO (NL) ES UNA TECNICA SEGURA DE CONSERVACION A LARGO PLAZO DE LOS RECURSOS GENETICOS SIENDO ESPECIALMENTE UTIL EN ESPECIES CON SEMILLAS RECALCITRANTES COMO LA ENCINA Y EL ALCORNOQUE. EL TERCER OBJETIVO PRETENDE EVALUAR LA POSIBILIDAD DE ALMACENAR EN NL EMBRIONES SOMATICOS DE ENCINA, ASPECTO QUE NO HA SIDO DEFINIDO HASTA LA FECHA. ELLO PERMITIRA CONSERVAR INDEFINIDAMENTE LOS GENOTIPOS ELITE. ADEMAS, ESTOS PROTOCOLOS SE APLICARAN EN LA CRIOCONSERVACION DE LAS LINEAS TRANSFORMADAS DE ENCINA Y ALCORNOQUE MIENTRAS SE EVALUA SU TOLERANCIA A LA ENFERMEDAD, LO QUE REDUCIRA NOTABLEMENTE LOS COSTES DE MANTENIMIENTO LCORNOQUE\TRANSFORMACIÓN GENÉTICA\TAUMATINA\QUITINASA\PROTEINA RICA EN CISTEINA\ENFERMEDAD DE "LA SECA"\ENCINA\EMBRIOGÉNESIS SOMÁTICA\CRIOCONSERVACIÓN\ÁRBOLES ÉLITE