Descripción del proyecto
EL USO GENERALIZADO DE BIOINSECTICIDAS BASADOS EN BACILLUS THURINGIENSIS (BT)(QUE CONTIENEN PROTEINAS CRY), ASI COMO DE CULTIVOS BT (CULTIVOS QUE EXPRESAN PROTEINAS CRY), DARA COMO RESULTADO, MAS TARDE O MAS TEMPRANO, LA APARICION DE RESISTENCIA EN LAS POBLACIONES TRATADAS, RESULTA POR TANTO NECESARIO OPTIMIZAR LA UTILIZACION DE COMPUESTOS INSECTICIDAS ALTERNATIVOS PARA EL TRATAMIENTO DE PLAGAS DE CULTIVOS Y QUE PRESENTEN BAJA TOXICIDAD PARA LAS ESPECIES NO DIANA, COMO POR EJEMPLO LAS PROTEINAS VIP3 DE BT, ESTAS PROTEINAS INSECTICIDAS FUERON DESCUBIERTAS MUCHO MAS TARDE QUE LAS PROTEINAS CRY Y NORMALMENTE NO SON APROVECHADAS EN LAS PREPARACIONES INSECTICIDAS CONVENCIONALES DE BT, YA QUE SON SECRETADAS AL MEDIO DE CULTIVO DURANTE LA FERMENTACION Y SE SUELEN PERDER AL CONCENTRAR LA BIOMASA RESULTANTE, LA CUAL SOLO CONTIENE LAS ESPORAS Y CRISTALES, LA ACCION DE LAS PROTEINAS VIP3 SOBRE LOS INSECTOS DIANA (LEPIDOPTEROS) ES POCO CONOCIDA, Y MUCHO MENOS SOBRE SU POSIBLE INTERACCION CON LAS PROTEINAS CRY, DE HECHO, LA UNICA PROTEINA VIP3 DE LA QUE SE POSEE CIERTA INFORMACION ES LA VIP3AA, LA CUAL HA SIDO YA INTRODUCIDA EN ALGODON Y MAIZ, ES DE PREVER QUE LOS GENES DE ESTAS NUEVAS PROTEINAS SE INCORPOREN RAPIDAMENTE A MAS CULTIVOS POR VARIOS MOTIVOS: AMPLIAR EL ESPECTRO DE ACCION INSECTICIDA Y COMO ESTRATEGIA PARA RETRASAR LA APARICION DE RESISTENCIA, EL PRESENTE PROYECTO PRETENDE CONTRIBUIR AL MEJOR CONOCIMIENTO DE LAS PROTEINAS INSECTICIDAS DE LA FAMILIA VIP3 CON EL FIN DE PODER EXPLOTAR TODO SU POTENCIAL PARA EL CONTROL DE PLAGAS, PARA ELLO, ESTUDIAREMOS EN DETALLE EL MODO DE ACCION DE ESTAS PROTEINAS INSECTICIDAS, BUSCANDO LOS EPITOPOS RESPONSABLES DE SU TOXICIDAD, ASI COMO LOS SITIOS DE UNION ESPECIFICOS EN LA MEMBRANA DEL INSECTO, PARA ASI PODER ENTENDER LOS PASOS LIMITANTES EN SU MODO DE ACCION Y PODER DISEÑAR, EN UN FUTURO, PROTEINAS MAS ACTIVAS, DENTRO DE ESTE ESTUDIO SE ANALIZARAN LOS PATRONES DE EXPRESION GENICA QUE RESULTAN ALTERADOS EN EL INSECTO EXPUESTO A ESAS TOXINAS, MEDIANTE EL ANALISIS DEL RNA DE INSECTOS EXPUESTOS VS, NO EXPUESTOS, ANALIZAREMOS TAMBIEN LA POSIBLE INTERACCION DE PROTEINAS VIP3 CON CRY, PARA VER SI SE DAN SINERGISMOS O ANTAGONISMOS, ASI COMO LA COMPLEMENTARIDAD ENTRE PROTEINAS VIP3 Y CRY EN CUANTO A NO PROVOCAR EL DESARROLLO DE RESISTENCIA CRUZADA ENTRE ELLAS, CON EL FIN DE AMPLIAR EL ARSENAL DE PROTEINAS VIP3, BUSCAREMOS NUEVOS GENES VIP3 EN UNA AMPLIA COLECCION DE AISLADOS DE BT, POR ULTIMO, SE BUSCARA UN METODO PARA LA EXPRESION DE LAS PROTEINAS VIP3 EN SISTEMAS HETEROLOGOS (ENCAPSULACION EN PSEUDOMONAS FLUORESCENS) PARA PERMITIR SU UTILIZACION EN INSECTICIDAS DE PULVERIZACION, COSA QUE POR EL MOMENTO NO SE ESTA HACIENDO POR NO SER ECONOMICAMENTE VIABLE SU RECUPERACION A PARTIR DEL SOBRENADANTE DE LA FERMENTACION, BACILLUS THURINGIENSIS\PROTEINAS VIP\CARACTERIZACION MOLECULAR\CARACTERIZACION INSECTICIDA\BIOENCAPSULACION