Descripción del proyecto
LOS CUERPOS DE LAS NEURONAS Y SUS DENDRITAS NO SE MIELINIZAN, ESTO SE DEBE A LA EXPRESION ESPECIFICA EN LA MEMBRANA SOMATODENDRITICA DE MOLECULAS QUE INHIBEN LA MIELINIZACION, COMO JAM2 (JUNCTION ADHESION MOLECULE 2), POR OTRA PARTE, DISTINTOS TIPOS DE NEURONAS CORTICALES PRESENTAN SEGMENTOS AXONALES NO-MIELINIZADOS QUE SE HAN RELACIONADO CON LA GESTION DE LAS FUNCIONES MAS COMPLEJAS DEL CEREBRO, PERO SU ORIGEN, COMPOSICION, REGULACION Y FUNCION SON DESCONOCIDAS, HEMOS ESTABLECIDO RECIENTEMENTE QUE LAS NEURONAS GENERAN SEGMENTOS AXONALES NO-MIELINIZADOS A TRAVES DE LA REGULACION DE DOMINIOS DE MEMBRANA QUE CONTIENEN LA LECTINA GALECTINA-4 (GAL-4), POR LO QUE GAL-4 ES EL UNICO INHIBIDOR DE LA MIELINIZACION AXONAL DESCRITO HASTA EL MOMENTO, AUN NO SE CONOCEN LA ESPECIFICIDAD NEURONAL, LA COMPOSICION MOLECULAR NI LOS MECANISMOS POR LOS QUE SE REGULAN LOS G4DS AUNQUE, SEGUN NUESTROS ESTUDIOS, ESTA REGULACION NO DEPENDE DE LA PRESENCIA DE MIELINA Y ESTA CONTROLADA POR LA NEURONA DURANTE SU MADURACION,EN ESTE PROYECTO UTILIZAREMOS NEURONAS Y OLIGODENDROCITOS DE ORIGEN HUMANO DERIVADAS DE LINEAS DE CELULAS MADRE PLURIPOTENTES HPSCS, PARA ESTABLECER: I) SI LOS SEGMENTOS NO-MIELINIZADOS (G4D) SE PRESENTAN EN TIPOS CONCRETOS DE NEURONAS CORTICALES, II) SI CONTIENEN OTROS COMPONENTES, ADEMAS DE LA GAL-4, ESENCIALES PARA LA INHIBICION LOCALIZADA DE LA MIELINIZACION AXONAL, Y III) SI SU REGULACION, QUE MODULA LA MIELINIZACION DE LOS AXONES, DEPENDE DE CAMBIOS EN LA ACTIVIDAD NEURONAL A LO LARGO DEL DESARROLLO NEURONAL, PARA CONSEGUIR ESTOS OBJETIVOS PONDREMOS A PUNTO UN SISTEMA MICROFUIDICO DE MIELINIZACION IN VITRO QUE NOS PERMITA EVALUAR LOS PARAMETROS DE LA MIELINIZACION USANDO CELULAS DERIVADAS DE HPSCS, APLICAREMOS ANALISIS DE IMAGEN CUANTITATIVO A INMUNOHISTOQUIMICAS DE CEREBRO E INMUNOFLUORESCENCIAS DE NEURONAS NO-PERMEABILIZADAS, ASI COMO ANALISIS PROTEOMICO A INMUNOPRECIPITADOS PARA IDENTIFICAR NUEVOS COMPONENTES DE LOS SEGMENTOS NO-MIELINIZADOS G4D,CREEMOS QUE LOS RESULTADOS DE ESTE PROYECTO CONTRIBUIRAN A EXPLICAR LA REGULACION Y FUNCION DE LOS SEGMENTOS AXONALES NO-MIELINIZADOS DE LAS NEURONAS CORTICALES, ASI COMO A IDENTIFICAR POSIBLES DIANAS MOLECULARES PARA EL DIAGNOSTICO Y TRATAMIENTO DE ENFERMEDADES DESMIELINIZANTES COMO LA ESCLEROSIS MULTIPLE, AXÓN\MEMBRANA\GLICOCONJUGADO\GALECTINA\MIELINA\NEURONA\ACTIVIDAD SINÁPTICA