BFU2017-83954-R
Financiado
CARACTERIZACION DE LA SEÑALIZACION Y REPARACION DE LA ROTURA DEL ADN EN TELOFASE Y EN LOS PUENTES DE ANAFASE.
LA ROTURA DE LA DOBLE CADENA DE ADN (DSB, DEL INGLES) ES UNO DE LOS MAYORES DAÑOS GENOTOXICOS PARA LAS CELULAS Y, PARADOJICAMENTE, JUEGA UN PAPEL ESENCIAL TANTO EN LA CARCINOGENESIS COMO EN LA TERAPIA ANTITUMORAL, SI EL DSB OCURRE...
LA ROTURA DE LA DOBLE CADENA DE ADN (DSB, DEL INGLES) ES UNO DE LOS MAYORES DAÑOS GENOTOXICOS PARA LAS CELULAS Y, PARADOJICAMENTE, JUEGA UN PAPEL ESENCIAL TANTO EN LA CARCINOGENESIS COMO EN LA TERAPIA ANTITUMORAL, SI EL DSB OCURRE EN G1, CUANDO LOS CROMOSOMAS AUN NO SE HAN REPLICADO, EL MECANISMO DE REPARACION PREFERIDO ES LA UNION DE EXTREMOS NO HOMOLOGOS (NHEJ, DEL INGLES), EN CASO DE QUE LOS CROMOSOMAS YA SE HAYAN REPLICADO (FASES S, G2 Y M DEL CICLO CELULAR), LA RECOMBINACION HOMOLOGA (HR, DEL INGLES) CON LA CROMATIDA HERMANA ES EL MECANISMO FAVORECIDO, EL CONTROL DE LA ELECCION NHEJ VS HR DEPENDE EN GRAN MEDIDA DE LA QUINASA DEPENDIENTE DE CICLINAS (CDK, DEL INGLES): LA BAJA ACTIVIDAD CDK EN G1 FAVORECE LA NHEJ, MIENTRAS QUE LA ALTA ACTIVIDAD CDK EN EL RESTO DEL CICLO FAVORECE LA HR, PARA QUE LA HR TENGA EXITO RESULTA ADEMAS ESENCIAL QUE LA CROMATIDA HERMANA INTEGRA, QUE SIRVE DE MOLDE A LA CROMATIDA ROTA, ESTE PROXIMA Y ALINEADA; ESTO ES POSIBLE GRACIAS AL COMPLEJO COHESINA, SI BIEN ESTE MODELO DE CONTROL DE LA REPARACION DE DSBS RESULTA ADECUADO PARA EXPLICAR LO QUE OCURRE EN G1, S, G2, PROFASE Y METAFASE; LA ANAFASE Y LA TELOFASE RESULTAN ESCENARIOS DEL CICLO CELULAR DONDE SE DA UNA GRAN PARADOJA: POR UN LADO LA ACTIVIDAD CDK SIGUEN SIENDO ALTA, LO QUE FAVORECERIA HR, MIENTRAS QUE, POR OTRO LADO, LAS CROMATIDAS HERMANAS YA NO ESTAN NI ALINEADAS NI PROXIMAS Y EL COMPLEJO COHESINA HA SIDO DESMANTELADO, ADEMAS, HAY CONDICIONES GENETICAS Y AMBIENTALES QUE FAVORECEN LA NO RESOLUCION COMPLETA DE LAS CROMATIDAS HERMANAS EN ANAFASE; POR EJEMPLO, LA PERDIDA DE ACTIVIDAD DE LA DIANA ANTITUMORAL TOPOISOMERASA II (TOP2), EN ESTAS CIRCUNSTANCIAS EXCEPCIONALES, DICHAS CROMATIDAS SE MANTIENEN PROXIMAS Y CONECTAN LOS NUCLEOS HIJOS A TRAVES DE PUENTES DE ANAFASE, UN DSB GENERADO EN DICHOS PUENTES, Y LA CONSIGUIENTE SEGREGACION DE LOS EXTREMOS A CADA UNO DE LOS NUCLEOS HIJOS, DARIA LUGAR A UN TIPO DE REPARACION MUTAGENICA, TANTO POR LA HR COMO POR LA NHEJ,EN ESTE PROYECTO PLANTEAMOS ABORDAR COMO LAS CELULAS RESPONDEN A DSBS GENERADOS EN: (I) TELOFASE SOBRE CROMATIDAS PERFECTAMENTE RESUELTAS Y SEGREGADAS, Y (II) ZONAS PROXIMAS A REGIONES CROMOSOMICAS PRESENTES EN PUENTES DE ANAFASE POR DEFICIENCIA DE TOP2, PARA ELLO USAREMOS MODELOS GENETICOS BASADOS EN SACCHAROMYCES CEREVISIAE QUE FAVORECEN LAS DOS CONDICIONES MENCIONADAS: (A) CEPAS QUE PORTAN EL ALELO TERMOSENSIBLE (TS) CDC15-2, QUE BLOQUEAN EL CICLO EN TELOFASE SIN PUENTES DE ANAFASE; (B) CEPAS QUE PORTAN EL ALELO TS CDC14-1, QUE BLOQUEAN LAS CELULAS CON UN PUENTE DE ANAFASE PARA EL BRAZO LARGO DEL CROMOSOMA XII (CXIIR) A LA ALTURA DEL TANDEM REPETITIVO DEL ADN RIBOSOMICO (RDNA); Y (C) CEPAS TOP2-5 CDC15-2, QUE DAN LUGAR A PUENTES DE ANAFASE FORMADOS POR MULTIPLES CROMOSOMAS, PARA LA GENERACION DE DSBS PLANTEAMOS EL USO DE (I) FLEOMICINA Y RADIACION (DSBS INESPECIFICOS), Y (II) SISTEMAS ENDONUCLEOLITICOS COMO HO, CRISPR/CAS9 Y QUIMERAS CON ENDONUCLEASAS (DSBS DIRIGIDOS POR SECUENCIA O LOCALIZACION), ENTRE NUESTROS OBJETIVOS ESTARIAN: (1) DEMOSTRAR SI LOS DSBS EN ANAFASE/TELOFASE GENERAN UNA RESPUESTA CELULAR Y DE QUE TIPO; (2) ELUCIDAR LOS COMPONENTES DE ESTA RESPUESTA (P, EJ,, COMPONENTES DEL CHECKPOINT); (3) DETERMINAR LA SUPERVIVENCIA CELULAR Y VARIACION GENETICA EN LOS SUPERVIVIENTES DE ESTOS DSBS; (4) ELUCIDAR LOS PASOS MOLECULARES DE LA REPARACION DE ESTOS DSBS Y EL PAPEL RESPECTIVO DE LA NHEJ Y LA HR; Y (5) IDENTIFICAR NUEVAS MOLECULAS QUE GENEREN DSBS Y PUENTES DE ANAFASE, PUENTES DE ANAFASE\TELOFASE\ROTURA DEL ADN\UNIÓN DE EXTREMOS NO HOMÓLOGOS\RECOMBINACIÓN HOMÓLOGA\GENOTÓXICOS
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Línea de financiación: concedida
El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2017-01-01
AEI
No se conoce la línea exacta de financiación, pero conocemos el organismo encargado de la revisión del proyecto.
Presupuesto
El presupuesto total del proyecto asciende a
171K€
Líder del proyecto
FUNDACIÓN CANARIA INSTITUTO DE INVESTIGACIÓN...
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