Descripción del proyecto
LAS BRUCELLAE SON LOS AGENTES CAUSANTES DE UNA ZOONOSIS QUE AFECTA AL GANADO Y AL SER HUMANO, B, ABORTUS Y B, MELITENSIS INFECTAN RUMIANTES, Y B, SUIS CERDOS Y FAUNA SALVAJE, ADEMAS, B, OVIS (UNA ESPECIE RUGOSA [R]) INFECTA OVEJAS, LA VACUNACION ES ESENCIAL PARA CONTROLAR LA BRUCELOSIS, PERO LAS UNICAS VACUNAS UTILES SON CEPAS ATENUADAS (B, MELITENSIS REV1 EN PEQUEÑOS RUMIANTES Y B, ABORTUS S19 EN GANADO VACUNO) QUE INDUCEN REACCIONES FALSAS EN TEST SEROLOGICOS IMPIDIENDO LA DIFERENCIACION DE ANIMALES INFECTADOS Y VACUNADOS (PROBLEMA DIVA), ADEMAS, NO SON TOTALMENTE SEGURAS O ESTABLES Y S19 NO INDUCE UNA PROTECCION OPTIMA, REV1 ES LA UNICA VACUNA DISPONIBLE FRENTE A B, OVIS Y, TRAS LA INTERRUPCION DE SU USO POR LA INTERFERENCIA SEROLOGICA, ES UN PROBLEMA EMERGENTE EN LA EU, LA BRUCELOSIS PORCINA POR B, SUIS BIOVAR 2 ES TAMBIEN UN PROBLEMA EMERGENTE EN LA EU, PARTICULARMENTE EN LA CRIA EXTENSIVA, YA QUE LOS JABALIES ESTAN COMUNMENTE INFECTADOS, NO HAY VACUNA FRENTE A B, SUIS Y EL GANADO PORCINO SE INFECTA A MENUDO CON BACTERIAS QUE DAN REACCIONES CRUZADAS CON BRUCELLA, POR LO QUE LOS RESULTADOS FALSOS POSITIVOS (FPSR) EN EL DIAGNOSTICO SON COMUNES, LOS TEST DE B, OVIS TAMBIEN CARECEN DE ESPECIFICIDAD Y SENSIBILIDAD, POR ELLO, SON NECESARIAS NUEVAS VACUNAS QUE RESUELVAN EL PROBLEMA DIVA Y MEJORAR LAS PRUEBAS DIAGNOSTICAS,EN PROYECTOS ANTERIORES, LOS EQUIPOS DEL PRESENTE HAN DESARROLLADO METODOS/PATENTES DIVA Y HERRAMIENTAS PARA MEJORAR LAS VACUNAS ESTABILIZANDO EL LPS, MUTANDO COMPONENTES (LPS, LIPIDOS Y PROTEINAS DE MEMBRANA EXTERNA [OMP]) Y GENES METABOLICOS RELACIONADOS CON LA VIRULENCIA, Y MEJORANDO METODOS INMUNOLOGICOS, BACTERIOLOGICOS Y MOLECULARES DE DIAGNOSTICO,LAS MEJORAS SOBRE B, MELITENSIS Y B, ABORTUS HAN SIDO COMERCIALIZADAS O CEDIDAS A EMPRESAS INTERESADAS EN SU DESARROLLO Y APLICACION, POR LO TANTO, ESTE PROYECTO ESTA ORIENTADO A EXTENDER LOS RESULTADOS DE LOS PROYECTOS ANTERIORES PARA SOLUCIONAR LOS PROBLEMAS GENERADOS POR B, OVIS Y B, SUIS, EN CONSECUENCIA, LOS OBJETIVOS SON: (A), MEJORAR LOS CANDIDATOS A VACUNAS DIVA PREVIAMENTE OBTENIDOS Y PROBAR SU EFICACIA Y SEGURIDAD EN OVEJAS FRENTE A B, OVIS; (B) OBTENER CANDIDATOS A UN PROTOTIPO DE VACUNA DIVA FRENTE A B, SUIS; Y (C), ACTUALIZAR LOS TEST DIAGNOSTICOS QUE COMPLEMENTAN EL METODO DIVA, LOS DEL DIAGNOSTICO DE LA BRUCELOSIS PORCINA EN EL CONTEXTO DE REACCIONES FALSAS POSITIVAS, Y LOS DE B, OVIS, TANTO EN B, OVIS COMO EN B, SUIS, LOS METODOS DIVA SE BASARAN EN EL MARCAJE CON GREEN FLUORESCENCE PROTEIN Y O-PS N-ACETILO DESARROLLADOS POR LOS EQUIPOS DE ESTE PROYECTO, LA ATENUACION Y LA MEJORA DE LA INMUNOGENICIDAD EN AMBOS TIPOS DE VACUNAS SE REALIZARA BASANDONOS EN RESULTADOS PREVIOS (DELECION DE OMPS, MODIFICACION DEL NUCLEO DEL LPS, TANTO EN CEPAS R COMO S); ADEMAS, PARA B, SUIS BIOVAR 2, EN LA EXTENSION DE NUESTROS RESULTADOS SOBRE LIPIDOS Y METABOLISMO, PARA GARANTIZAR ASI UN BALANCE ADECUADO INMUNOGENICIDAD/ATENUACION Y PROPONER UN PROTOTIPO DE VACUNA B, SUIS, FINALMENTE, SE REALIZARA UN ESTUDIO PROTEOMICO DE ANTIGENOS DE BRUCELLA PARA IDENTIFICAR CANDIDATOS QUE SOLUCIONEN EL PROBLEMA DE LAS REACCIONES FALSAS POSITIVAS, Y UNA MEJORA DE UN MEDIO DE CULTIVO DE ENRIQUECIMIENTO PARCIALMENTE DEFINIDO QUE, COMBINADO CON LA PCR APROPIADA, PUEDA FACILITAR EL DIAGNOSTICO, INCLUYENDO LA IDENTIFICACION DE NUEVAS VACUNAS, BRUCELA\BRUCELOSIS\VACUNAS\DIVA\DIAGNÓSTICO\OVINO\PORCINO