Innovating Works

BIO2008-04542-C02-02

Financiado
BASES MOLECULARES DE LA BIODEGRADACION DE CIANURO
ESTA SOLICITUD ES CONTINUACION DE UNA PROYECTO ANTERIOR TITULADO ¿MECANISMOS IMPLICADOS EN LA BIODEGRADACION DE CIANURO¿ (BIO2005-07441-C02-02) EN EL QUE SE ACLARARON ALGUNOS ASPAECTOS RELACIONADOS CON LA ASIMILACION DE CIANURO PO... ESTA SOLICITUD ES CONTINUACION DE UNA PROYECTO ANTERIOR TITULADO ¿MECANISMOS IMPLICADOS EN LA BIODEGRADACION DE CIANURO¿ (BIO2005-07441-C02-02) EN EL QUE SE ACLARARON ALGUNOS ASPAECTOS RELACIONADOS CON LA ASIMILACION DE CIANURO POR LA BACTERIA ALCALOFILA PSEUDOMONAS PSEUDOALCALIGENES CECT5344, PREVIAMENTE AISLADA POR ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO, ADEMAS, EN EL ANTERIOR PROYECTO SE HA GENERADO UN BORRADOR DEL GENOMA COMPLETO DE LA BACTERIA (APROX, 7X), LA ASIMILACION SE PLANTEO DESDE EL PRINCIPIO EN UN AMPLIO MARCO INCLUYENDO LOS MECANISMOS DE RESISTENCIA, ADEMAS DE LA RUTA DE ASIMILACION, ASI, EN EL PROYECTO ANTERIOR SE DEMOSTRO QUE LA RESISTENCIA A CIANURO RADICA EN UNA OXIDASA TERMINAL INSENSIBLE A CIANURO (CIO) RELACIONADA CON EL CITOCROMO BD, EL OPERON CONTIENE 5 GENES, INCLUYENDO CIOAB, LO MAS RELEVANTE DE ESTE OPERON INDUCIBLE POR CIANURO ES QUE COMIENZA CON UNA POSIBLE SULFITO/NITRITO-REDUCATASA (SIR/NIR) QUE NO SE HABIA DESCRITO HASTA AHORA EN OTRAS BACTERIAS DENTRO DE ESTE CONTEXTO, PERO QUE APARECE CONSERVADO EN ALGUNOS GENOMAS DE BACTERIAS RELACIONADAS QUE ESTAN DISPONIBLES EN LAS BASES DE DATOS, ESTE GEN NO ES NECESARIO PARA LA RESISTENCIA A CINURO EN MEDIO RICO (LB), PERO SOROPRENDENTEMENTE SI LO ES PARA LA RESISTENCIA EN MEDIO MINIMO, ADEMAS, LA EXPRESION HETEROLOGA DE CIOAB DE LA ESTIRPE CECT5344 EN E, COLI LE CONFIERE A ESTA ULTIMA RESISTENCIA A CIANURO, PERO EL EFECTO NO ES TAN CLARO CUANDO SE SOBREEXPRESA EN LA PROPIA CEPA, LA SECUENCIACION DEL GENOMA COMPLETO DE LA BACTERIA, DESARROLLADO EN EL ANTERIOR PROYECTO, HA REVELADO LA EXISTENCIA DE OTROS DOS OPERONES CIO EN EL GENOMA (CIO2 Y CIO3), POR LO TANTO, EN ESTE CONTEXTO LOS OBJETIVOS QUE SE PLANTEAN SON CONOCER EL PAPEL DE SIR/NIR EN EL PROCESO, AVERIGUAR LA FUNCION QUE LOS OTROS DOS OPERONES JUEGAN EN LA RESISTENCIA A CIANURO Y LA ESTUDIAR LA REGULACION DE LOS TRES OPERONES CIO, REFERENTE A LA ASIMILACION DE CIANURO CABE DESTACAR QUE HEMOS DESCUBIERTO QUE EL L-MALATO ES UN EXCELENTE DONADOR DIRECTO (SIN NAD+) DE ELECTRONES PARA LA RESPIRACION, OXIDANDOSE A OXALACETATO QUE REACCIONA CON EL CIANURO FORMANDOSE LA CORRESPONDIENTE CIANOHIDRINA, EL METABOLISMO Y ASIMILACION DE CIANOHIDRINAS ES UN OBJETIVO DEL SUBPROYECTO 1, PERO EN ESTE SUBPROYECTO SE ESTUDIARA EL PAPEL Y LA REGULACION DE LAS DOS MALATO-QUINONA-OXIDORREDUCTASAS (MQO) ENCONTRADAS EN EL GENOMA DE LA BACTERIA, EN EXTRACTOS CRUDOS TAMBIEN EL FUMARATO ES SUSTRATO PARA LA RESPIRACION, EL FUMARATO ES SUSTRATO DE LA FUMARASA QUE LO TRANSFORMA EN L-MALATO QUE FINALMENTE ES SUSTRATO DE LA MQO, TAMBIEN SE HAN ENCONTRADO DOS FUMARASAS EN EL GENOMA, UNA SIN HIERRO PROBABLEMENTE REGULADA POR FUR Y OTRA CON HIERRO, ES POR ELLO QUE SE PLANTEAN COMO OBJETIVOS CONOCER EL PAPEL DE LAS FUMARASAS Y DE FUR COMO REGULADOR GENERAL, EN EL METABOLISMO DEL CIANURO, POR ULTIMO, HEMOS CONSEGUIDO PURIFICAR PARCIALMENTE Y CLONAR EL GEN DE UNA 3-CIANOALANINA HIDRATASA/NITRILASA QUE ES INDUCIBLE POR CIANURO, LA SECUENCIACION DEL GENOMA HA REVELADO QUE EL GEN SE ENCUENTRA TRAS EL OPERON CIO1 AGRUPADO CON GENES RELACIONADOS CON EL METABOLISMO DE AMINOACIDOS QUE PODRIAN CONSTITUIR UNA RUTA DE SINTESIS DE 3-CAINOALANINA, POR LO TANTO, SE PLANTEA COMO OBJETIVO CONOCER EL PAPEL DE TODOS ESTOS GENES, ASI COMO EL DE UNA RODANASA (AGRUPADA JUNTO A CIO2) EN LA ASIMILACION DE CIANURO POR PSEUDOMONAS PSEUDOALCALIGENES CECT5344,FINALMENTE, PROPONEMOS ANOTAR Y PUBLICAR EL BORRADOR DEL GENOMA DE LA BACTERIA EN COLABORACION CON EL INB, cianuro\biodegradación\respiracion\nitrilasa\rodanasa ver más
01/01/2008
UNEX
145K€
Perfil tecnológico estimado

Línea de financiación: concedida

El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2008-01-01
Presupuesto El presupuesto total del proyecto asciende a 145K€
Líder del proyecto
UNIVERSIDAD DE EXTREMADURA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.
Total investigadores 803