Descripción del proyecto
LOS ARN LARGOS NO CODIFICANTES (LNCRNA) SON TRANSCRITOS COMUNES QUE EXISTEN EN LOS GENOMAS, INCLUIDOS LOS DEL GANADO BOVINO Y EQUINO, QUE TIENEN UN TAMAÑO DE MAS DE 200 PB Y SE SABE QUE REGULAN LA EXPRESION DE GENES IMPLICADOS EN PROCESOS CELULARES CRUCIALES COMO LA PROLIFERACION, LA DIFERENCIACION, LA APOPTOSIS, ETC. SI BIEN LOS ARN PEQUEÑOS NO CODIFICANTES SE HAN ESTUDIADO EXTENSAMENTE EN EL DESARROLLO DE LAS CELULAS GERMINALES MASCULINAS, EL PAPEL DE LOS LNCRNA EN LA ESPERMATOGENESIS Y EN EL ESPERMATOZOIDE SIGUE SIENDO EN GRAN PARTE DESCONOCIDO. SE SABE QUE LOS TESTICULOS DE LOS MAMIFEROS EXPRESAN MAS DEL DOBLE DE GENES LNCRNA QUE CUALQUIER OTRO TEJIDO; Y QUE AL IGUAL QUE LOS GENES QUE CODIFICAN PROTEINAS, LOS GENES LNCRNA ESTAN COMPUESTOS POR INTRONES Y EXONES, Y DESPUES DE SU TRANSCRIPCION, ESTAN SUJETOS A UN PROCESAMIENTO (SPLICING) CONSTITUTIVO Y/O ALTERNATIVO QUE PUEDE PRODUCIR DIFERENTES VARIANTES CON DIFERENTES FUNCIONES. EL PROCESAMIENTO PUEDE PRODUCIR TAMBIEN ARN CIRCULARES (CIRCRNA) QUE PUEDEN ACTUAR COMO UNA ESPONJA PARA MIRNA Y, POR LO TANTO, REGULAR LA EXPRESION DEL GEN DIANA INHIBIENDO LA ACTIVIDAD DE MIRNA O PARTICIPAR EN LA ACUMULACION DE MIRNA EN LOS ESPERMATOZOIDES COMO PARTE DE LA HERENCIA EPIGENETICA. DADO QUE LOS LNCRNA DESEMPEÑAN UN PAPEL IMPORTANTE EN LOS ESTUDIOS GENOMICOS Y DE FERTILIDAD, ASI COMO EN LA HERENCIA EPIGENETICA, SU CARACTERIZACION EN LOS GENOMAS DE LOS ANIMALES DE GRANJA ES FUNDAMENTAL PARA CERRAR LA BRECHA ENTRE EL GENOTIPO, EL FENOTIPO Y LA HERENCIA EPIGENETICA. EL PRIMER OBJETIVO SERA ANALIZAR LA BIOLOGIA Y PAPEL DE LOS LNCRNA (Y OTROS NCRNAS) EN LA ESPERMATOGENESIS EN 2 ANIMALES DE GRANJA (BOVINOS Y EQUINOS), ANALIZANDO EN PROFUNDIDAD LAS VARIANTES E ISOFORMAS DE LOS LNCRNA Y SU INTERACCION CON EL RESTO DE RNAS DE LOS TESTICULOS PARA ANALIZAR SU IMPLICACION FUNCIONAL EN LA ESPERMATOGENESIS, Y VALIDANDO LA FUNCIONALIDAD DE ALGUNAS VARIANTES DE LNCRNA EN MODELOS DE RATON PRODUCIDOS POR CRISPR (COMO EL LNCRNA RPPH1, QUE HEMOS IDENTIFICADO QUE TIENE UNA ISOFORMA CON UN PAPEL CLAVE EN LA MEIOSIS). EL SEGUNDO OBJETIVO SERA ANALIZAR EL PAPEL DE LOS CIRCRNAS (Y OTROS NCRNAS) EN EL ESPERMATOZOIDE DE ANIMALES DE GRANJA (BOVINOS Y EQUINOS) ANALIZANDO LA PRESENCIA DE CIRCRNAS Y SU INTERACCION CON EL RESTO DE RNAS, Y VALIDANDO LA TRANSMISION EPIGENETICA DE CIRCRNAS (Y MIRNAS) UTILIZANDO 2 MODELOS: UN MODELO DE ESTRES Y TRANSMISION TRANSGENERACIONAL EPIGENETICA EN RATONES PARA ANALIZAR SU EFECTO EPIGENETICO; Y UN SEGUNDO MODELO PARA VALIDAR ALGUNOS DE LOS CIRCRNA PRESENTES EN LOS ESPERMATOZOIDES Y QUE SE SUGIERE QUE ESTAN IMPLICADOS EN TRANSMISION EPIGENETICA MEDIADA POR EL ESPERMATOZOIDE, COMO CIRCNAPEPLD (PRODUCIREMOS RATONES KNOCKOUT PARA NAPEPLD PARA ANALIZAR SUS EFECTOS SOBRE LA TRANSMISION DE MIRNA Y SOBRE EL DESARROLLO EMBRIONARIO Y LA TRANSMISION EPIGENETICA). EL TERCER OBJETIVO SERA ANALIZAR LA RELACION ENTRE LOS LNCRNA DE LOS ESPERMATOZOIDES Y LA FERTILIDAD DEL TORO, LA DISMINUCION DE LA FERTILIDAD INDUCIDA POR EL ESTRES, LA PROPORCION DE SEXOS Y EL ENVEJECIMIENTO; ANALIZANDO TOROS CON DIFERENTE TASA DE FERTILIDAD, Y ANALIZANDO EN TOROS Y CABALLOS TANTO LA PRESENCIA Y FUNCION EN EL ESPERMA DE LNCRNAS RELACIONADOS CON LA PROPORCION DE SEXOS COMO TESHL (QUE SE ENCUENTRA EN RATONES Y HUMANOS), Y CON LA DISMINUCION DE LA FERTILIDAD INDUCIDA POR EL ESTRES POR CALOR COMO BOULE (QUE SE ENCUENTRA EN MOSCAS Y HUMANO). ORO\STRESS\EPIGENETICA\RNAM\MIRNA\CIRRNA\LNCRNA\FERTILIDAD\ESPERMATOZOIDE\CABALLO