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BFU2011-25902

Financiado

ANALISIS ESTRUCTURAL EXHAUSTIVO DE ENSAMBLADOS MACROMOLECULARES VIRALES

LA UNIDADES FUNCIONALES DE LA CELULA SON COMPLEJAS ASOCIACIONES DE MACROMOLECULAS ALTAMENTE ORDENADAS QUE CONTROLAN TODOS LOS PROCESOS FUNDAMENTALES DE LA BIOLOGIA. ESTOS MULTIMEROS ESTAN FORMADOS POR PROTEINAS (Y ACIDOS NUCLEICOS... ver más

01/01/2011

CSIC

166K€

Presupuesto del proyecto: 166K€

Líder del proyecto

AGENCIA ESTATAL CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGA... No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

TRL 2-3 | 552M€

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Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2011-01-01

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Participantes

CSIC

Lider

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Líder del proyecto

AGENCIA ESTATAL CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGA...

TRL 2-3 | 552M€

Presupuesto del proyecto 166K€

Descripción del proyecto LA UNIDADES FUNCIONALES DE LA CELULA SON COMPLEJAS ASOCIACIONES DE MACROMOLECULAS ALTAMENTE ORDENADAS QUE CONTROLAN TODOS LOS PROCESOS FUNDAMENTALES DE LA BIOLOGIA. ESTOS MULTIMEROS ESTAN FORMADOS POR PROTEINAS (Y ACIDOS NUCLEICOS) QUE PARTICIPAN DE FORMA ESTABLE O TRANSITORIA. NUESTROS SISTEMAS MODELO DE AGREGADOS SUPRAMOLECULARES O NANOMAQUINAS SON LAS CAPSIDAS VIRALES Y OTROS ENSAMBLADOS. LOS VIRUS PROPORCIONAN EXCELENTES SISTEMAS MODELO PARA EL ANALISIS ESTRUCTURAL A ALTA RESOLUCION, REQUISITO FUNDAMENTAL PARA LA INTERPRETACION DE SUS PROPIEDADES Y ORGANIZACION A NIVEL MOLECULAR. NUESTROS ESTUDIOS TIENEN COMO OBJETIVO ESTABLECER LAS BASES DE LA FLEXIBILIDAD CONFORMACIONAL DE LAS PROTEINAS VIRALES Y SUS IMPLICACIONES FUNCIONALES EN EL CICLO DEL VIRUS. NUESTRO GRUPO ESTA ESTUDIANDO SISTEMAS VIRALES COMPLEMENTARIOS DE DIVERSA COMPLEJIDAD ESTRUCTURAL, DESDE VIRUS RNA DE CADENA DOBLE (DSRNA) COMO EL VIRUS DE LA BURSITIS INFECCIOSA (IBDV) Y EL VIRUS DEL HONGO PENICILLIUM CHRYSOGENUM (PCV), HASTA VIRUS RNA DE CADENA SENCILLA COMO EL VIRUS DE LA FIEBRE HEMORRAGICA DEL CONEJO (RHDV). ESTE PROYECTO SE LLEVARA A CABO BASADO FUNDAMENTALMENTE EN LA METODOLOGIA DE LA CRIOMICROSCOPIA ELECTRONICA TRIDIMENSIONAL (3D-CRYOEM), Y SU OBJETIVO GENERAL ES ESTABLECER LAS RELACIONES ESTRUCTURA-FUNCION DE LOS COMPLEJOS MACROMOLECULARES A NIVEL MOLECULAR. LOS OBJETIVOS ESPECIFICOS SON:1. POLIMORFISMO ESTRUCTURAL DE LA PROTEINAS DE LA CAPSIDA: A) 3D-CRYOEM Y CARACTERIZACION INMUNOLOGICA DE CAPSIDAS QUIMERICAS BASADAS EN LA PROTEINA DE LA CAPSIDA DE IBDV CONTENIENDO LA PROTEINA HETEROLOGA EGFP O PEPTIDOS DE LA HEMAGLUTININA DEL VIRUS DE LA GRIPE AVIAR, Y B) ESTABLECER LAS BASES MOLECULARES QUE INCREMENTAN EL POLIMORFISMO ESTRUCTURAL DE LA PROTEINA DE LA CAPSIDA DE RHDV MEDIANTE LA INSERCION DE EPITOPOS HETEROLOGOS.2. BIOLOGIA ESTRUCTURAL DE COMPLEJOS MACROMOLECULARES DE IBDV: A) RECONSTRUCCIONES TRIDIMENSIONALES CON SIMETRIA HELICOIDAL DE ENSAMBLADOS TUBULARES DE LA PROTEASA VP4 Y DE LOS PRECURSORES DE LA PROTEINA DE LA CAPSIDA, B) ESTRUCTURA DE LA PROCAPSIDA DE IBDV, Y C) PUESTA A PUNTO DE SISTEMAS DE ENSAMBLAJE Y DESENSAMBLAJE IN VIVO E IN VITRO DE PSEUDO-PARTICULAS VIRALES T=13, CON EL OBJETIVO ULTIMO DE OBTENER PARTICULAS SIMILARES A LOS VIRIONES AUTENTICOS.3. ANALISIS ESTRUCTURAL TRIDIMENSIONAL Y FUNCIONAL DE COMPLEJOS RIBONUCLEOPROTEICOS (RNP) DE IBDV: A) CARACTERIZACION BIOQUIMICA DE LAS RNP PARA DETERMINAR LA RELACION PROTEINA:ACIDO NUCLEICO EN LA QUE SUS PROPIEDADES SON FUNCIONALES, Y DEFINIR SU ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL, B) MECANISMOS QUE PERMITEN A LA PROTEINA MULTIFUNCIONAL VP3 ADQUIRIR LAS DISTINTAS FUNCIONES A LO LARGO DEL CICLO VITAL DE IBDV, Y C) CARACTERIZACION STRUCTURAL DE LA RNA-POLIMERASA Y SUS COMPLEJOS.4. ANALISIS ESTRUCTURAL DE VIRUS DSRNA DE EUCARIOTAS INFERIORES: A) 3D-CRYOEM DE PCV A RESOLUCIONES CUASI-ATOMICAS QUE PERMITA TRAZAR LA CADENA POLIPEPTIDICA DE LA PROTEINA, Y B) 3D-CRYOEM DE OTROS CHRYSOVIRUS DE HONGOS COMO EL VIRUS DE CRYPHONECTRIA NITSCHKIE Y EL VIRUS DE ROSELLINIA NECATRIX PARA DETERMINAR SI EL MODULO ESTRUCTURAL DE PCV ES UN PLEGAMIENTO PRESERVADO EN VIRUS DSRNA. 5. ESTABLECIMIENTO DE NOVO DE UN SISTEMA MODELO DE VIRUS, EL PICOBIRNAVIRUS (PBV) HUMANO. DEBIDO A NUESTRA EXPERIENCIA PREVIA CONTRASTADA EN EL CAMPO DE LOS VIRUS DSRNA HEMOS SELECCIONADO EL PBV, UN VIRUS QUE CAUSA UNA PATOGENESIS SUAVE. ESTA PARTE DEL PROYECTO SERA INICIADA A PARTIR DE UN DNA SINTETICO QUE ABARCA SU GENOMA COMPLETO. RIOMICROSCOPIA ELECTRONICA\CAPSIDA\VIRUS\POLIMORFISMO ESTRUCTURAL\COMPLEJOS MACROMOLECULARES\RECONSTRUCCION TRIDIMENSIONAL

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