Descripción del proyecto
EL VIRUS DEL MOSAICO DE PEPINO DULCE (PEPINO MOSAIC VIRUS, PEPMV; GENERO POTEXVIRUS, FAMILIA ALPHAFLEXIVIRIDAE) ES UNO DE LOS VIRUS MAS IMPORTANTES QUE AFECTA A LOS CULTIVOS DE TOMATE EN TODO EL MUNDO, NUESTRO GRUPO HA TRABAJADO EN DOS PROYECTOS PREVIOS ORIENTADOS HACIA LA CREACION DE VARIEDADES DE TOMATE RESISTENTES A PEPMV MEDIANTE LA IDENTIFICACION DE FACTORES DE SUSCEPTIBILIDAD DEL HUESPED (AGL2012-37390) Y SU MODIFICACION BIOTECNOLOGICA (AGL2015-65838-R), EN PARTICULAR, EN EL PROYECTO AGL2012-37390 IDENTIFICAMOS 26 PROTEINAS DE TOMATE QUE INTERACTUABAN CON LAS PROTEINAS DE PEPMV EN UN ESCRUTINIO DE DOBLE HIBRIDO DE LEVADURA, EN EL PROYECTO AGL2015-65838-R TRABAJAMOS CON 4 DE ESTAS PROTEINAS, VALIDANDO LAS INTERACCIONES Y PRODUCIENDO MUTANTES DE TOMATE USANDO LA TECNOLOGIA CRISPR/CAS9; ASI, HEMOS GENERADO DATOS DE IMPORTANCIA TANTO DESDE UN PUNTO DE VISTA FUNDAMENTAL COMO APLICADO, POR LO TANTO, ESTAMOS FIRMEMENTE CONVENCIDOS DE QUE HACER TRABAJO ADICIONAL CON EL RESTO DE LOS INTERACTORES DE TOMATE IDENTIFICADOS EN AGL2012-37390 TIENE UN GRAN POTENCIAL PARA SEGUIR GENERANDO RESULTADOS DE IMPACTO, EN ESTE PROYECTO, PROPONEMOS TRABAJAR CON 8 NUEVOS INTERACTORES QUE INTERACTUARON CON LAS PROTEINAS 1 DEL BLOQUE TRIPLE DE GENES (TRIPLE GENE BLOCK 1, TGB1) Y DE LA CAPSIDA (CAPSID PROTEIN, CP) DE PEPMV, AMBAS SON PROTEINAS MULTIFUNCIONALES EXTREMADAMENTE INTERESANTES, IMPLICADAS EN LA SUPRESION DEL SILENCIAMIENTO DE RNA, EL TRAFICO VIRAL Y LA ARQUITECTURA DE LAS FACTORIAS VIRALES Y, PARA LA CP, LA ARQUITECTURA DEL VIRION, EN LOS DOS PRIMEROS OBJETIVOS ESPECIFICOS DEL PROYECTO PROPONEMOS TRABAJAR PARA VALIDAR LAS INTERACCIONES, Y LUEGO EMPLEAREMOS UNA COMBINACION DE ENFOQUES PARA EL ANALISIS FUNCIONAL Y LA COMPRENSION DE LA RELEVANCIA BIOLOGICA DE LAS INTERACCIONES, INCLUYENDO LA DETERMINACION DETALLADA DE SU LOCALIZACION CELULAR, EL ANALISIS DE ACTIVIDADES ENZIMATICAS Y LA GENERACION Y CARACTERIZACION DE NUEVOS MUTANTES DE TOMATE UTILIZANDO LA TECNOLOGIA CRISPR/CAS9, DADA LA ANOTACION DE LAS PROTEINAS QUE INTERACTUAN, PARA LOS ANALISIS FUNCIONALES HEMOS PLANEADO EXPERIMENTOS RELACIONADOS CON EL METABOLISMO DEL RNA VIRAL, EL CONTROL TRANSCRIPCIONAL DE LAS RESPUESTAS DEL HUESPED Y EL ESTADO REDOX DE LA CELULA HUESPED, ADEMAS, ABORDAREMOS DOS OBJETIVOS MAS TRANSVERSALES, QUE INCLUYEN LA CARACTERIZACION MORFOLOGICA Y ESTRUCTURAL DE LAS FACTORIAS VIRALES Y LA GENERACION DE DATOS TRANSCRIPTOMICOS QUE PERMITIRAN ADQUIRIR UNA VISION GENERAL DE LAS RESPUESTAS DE LAS PLANTAS DE TOMATE A LA INFECCION CON PEPMV, EN RESUMEN, NUESTRA NUEVA PROPUESTA SE BASA EN EL CONOCIMIENTO Y LA EXPERIENCIA ADQUIRIDA DURANTE DOS PROYECTOS ANTERIORES, Y TIENE COMO OBJETIVO GENERAR CONOCIMIENTO FUNDAMENTAL ORIENTADO A LA COMPRENSION DE LAS INTERACCIONES MOLECULARES ENTRE LOS POTEXVIRUS Y SUS PLANTAS HUESPED CRISPR/CAS\FACTORÍA VIRAL\GST\POTEXVIRUS\RNASA H\TOMATE\VIRUS