ANALISIS DE CAMBIOS NUTRICIONALES EN CIANOBACTERIAS: RESPUESTA A LA FUENTE DE NI...
ANALISIS DE CAMBIOS NUTRICIONALES EN CIANOBACTERIAS: RESPUESTA A LA FUENTE DE NITROGENO, EL ESTADO REDOX INTRACELULAR Y LA DISPONIBILIDAD DE COBRE.
ESTE PROYECTO ABORDARA COMO DETERMINADOS CAMBIOS NUTRICIONALES EN CIANOBACTERIAS AFECTAN AL CONTROL DE PROCESOS METABOLICOS CENTRALES COMO LA FOTOSINTESIS, ASIMILACION DE NITROGENO Y FIJACION DE CARBONO. PARA ELLO SE COMPARARAN TR...
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Descripción del proyecto
ESTE PROYECTO ABORDARA COMO DETERMINADOS CAMBIOS NUTRICIONALES EN CIANOBACTERIAS AFECTAN AL CONTROL DE PROCESOS METABOLICOS CENTRALES COMO LA FOTOSINTESIS, ASIMILACION DE NITROGENO Y FIJACION DE CARBONO. PARA ELLO SE COMPARARAN TRES SISTEMAS DISTINTOS: CAMBIO EN LA FUENTE DE NITROGENO (AMONIO VERSUS CARENCIA DE NITROGENO), CAMBIO EN EL ESTADO REDOX CELULAR A TRAVES DEL ANALISIS DE UN MUTANTE REGULADO DE LA TIORREDOXINA TRXA Y LA DISPONIBILIDAD DE COBRE EN EL MEDIO DE CULTIVO. PARA ESTUDIAR ESTOS PROCESOS UTILIZAREMOS LA CIANOBACTERIA UNICELULAR SYNECHOCYSTIS SP. PCC 6803, CONSIDERADA UN SISTEMA MODELO PARA ESTUDIOS FOTOSINTETICOS. ADEMAS, RECIENTEMENTE HA SIDO MUY UTILIZADA EN APLICACIONES BIOTECNOLOGICAS RELACIONADAS CON LA SINTESIS DE BIOCOMBUSTIBLES. EN RELACION CON EL PROYECTO ACTUALMENTE EN VIGOR (BFU2013-15708) ESTA PROPUESTA TIENE ASPECTOS DE CONTINUIDAD. UNA PARTE DE LOS RESULTADOS QUE SE ESTAN GENERANDO SON LA BASE DE LA PROPUESTA QUE SE PRESENTA, EN ESPECIAL TODA UNA AMPLIA SERIE DE MUTANTES Y HERRAMIENTAS MOLECULARES Y METABOLICAS QUE PERMITIRAN ALCANZAR LOS OBJETIVOS QUE SE PLANTEAN. LA UBICACION DE ESTE PROYECTO EN EL AREA DE GESTION DE BIOTECNOLOGIA RESPONDE EN GRAN PARTE AL CRECIENTE INTERES BIOTECNOLOGICO QUE PRESENTAN ESTOS ORGANISMOS. EN ESTE SENTIDO, EL EQUIPO INVESTIGADOR APORTA SU BAGAJE DE CONOCIMIENTO EN EL METABOLISMO Y SU REGULACION A LA POTENCIAL APLICACION DE ESTOS ORGANISMOS EN LA PRODUCCION DE COMPUESTOS DE INTERES BIOTECNOLOGICO. LOS OBJETIVOS CONCRETOS DEL PROYECTO SON:1. ASIGNACION DE FUNCIONES A NUEVAS PROTEINAS QUE RESPONDEN A CAMBIOS EN LA FUENTE DE NITROGENO. SE DETERMINARA LA FUNCION DE DOS PROTEINAS CODIFICADAS POR LOS GENES SSR0692 Y SLL0944 QUE SE EXPRESAN EN AMONIO Y EN CARENCIA DE NITROGENO RESPECTIVAMENTE. EL OBJETIVO ES ANALIZAR NUEVOS MECANISMOS EN EL CONTROL DEL METABOLISMO DEL NITROGENO EN SYNECHOCYSTIS. SE IDENTIFICARAN LOS INTERACTORES DE ESTAS PROTEINAS COMO BASE PARA ESTABLECER SU FUNCION EN LA ADAPTACION DEL METABOLISMO CELULAR. 2. ANALISIS DEL ESTADO REDOX CELULAR MEDIADO POR LA TIORREDOXINA TRXA (TIPO M DE PLANTAS). MEDIANTE EL USO DEL MUTANTE STXA2, QUE PRESENTA NIVELES REGULADOS DE TRXA, SE ANALIZARA IN VIVO EL METABOLISMO FOTOSINTETICO Y EL ESTADO REDOX, IN VIVO E IN VITRO, DE PROTEINAS IMPLICADAS EN EL CICLO DE CALVIN (FBPASA Y LA SBPASA) Y DE ENZIMAS DE LA SINTESIS DE GLUCOGENO (PGM, AGP). SE IDENTIFICARAN DIANAS DE TRXA, MEDIANTE LA DETERMINACION DEL PROTEOMA REDOX COMPARADO DE LA ESTIRPE STXA2 (CON BAJOS NIVELES DE TRXA Y OXIDADO) CON LA SILVESTRE (NIVELES NORMALES). FINALMENTE SE REALIZARA UN ESTUDIO MOLECULAR Y ESTRUCTURAL QUE DETERMINE QUE REGION DE TRXA ES NECESARIA PARA DESEMPEÑAR SU PAPEL ESENCIAL EN CIANOBACTERIAS.3. ESTUDIO DEL REGULADOR QUE DETERMINA CUAL ES EL DONADOR DE ELECTRONES AL FOTOSISTEMA I (CITOCROMO C6 O PLASTOCIANINA) EN FUNCION DE LA DISPONIBILIDAD DE COBRE. CARACTERIZAREMOS EL FACTOR TRANSCRIPCIONAL DENOMINADO PETR CUYA AUSENCIA EN SYNECHOCYSTIS DA LUGAR A LA PERDIDA DE LA EXPRESION DEL GEN PETJ (CIT C6) Y LA EXPRESION CONSTITUTIVA DEL GEN PETE (PLASTOCIANINA). SE LLEVARA A CABO UN ESTUDIO MOLECULAR QUE INCLUIRA EL ANALISIS DE LAS SECUENCIAS DE DNA RECONOCIDAS POR DICHO FACTOR, EL MECANISMO QUE PERMITE DETECTAR LA PRESENCIA DE COBRE EN LA CELULA Y LA IDENTIFICACION DEL REGULON DE ESTE FACTOR MEDIANTE UNA APROXIMACION TRANSCRIPTOMICA GLOBAL. IANOBACTERIA\TIORREDOXINA.\PLASTOCIANINA\METABOLISMO DEL NITRÓGENO\GLUCÓGENO\FOTOSÍNTESIS\COBRE\CITOCROMO C6
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